1.基于二维液相色谱同时检测生物样本中钩吻素甲、钩吻素子和钩吻素己的方法,其特征在于:包括以下步骤:
1)将生物样本进行前处理,得到待测溶液;
2)待测溶液进样2D-LC-UV系统进行检测;
3)检测结果进行定量分析。
2.根据权利要求1所述的基于二维液相色谱同时检测生物样本中钩吻素甲、钩吻素子和钩吻素己的方法,其特征在于:所述生物样本包括血浆样本、尿液样本及组织样本。
3.根据权利要求2所述的基于二维液相色谱同时检测生物样本中钩吻素甲、钩吻素子和钩吻素己的方法,其特征在于:所述血浆样本进行前处理的方法:将血浆样本按体积比3~5:10加入甲醇/乙腈混合溶液中震荡,涡旋20~40s,离心,取上清液;其中,甲醇/乙腈混合溶液中V甲醇/V乙腈=20:75~85。
4.根据权利要求2所述的基于二维液相色谱同时检测生物样本中钩吻素甲、钩吻素子和钩吻素己的方法,其特征在于:所述尿液样本进行前处理方法:尿液样本进行离心,过
0.22μm滤膜,取上清液。
5.根据权利要求2所述的基于二维液相色谱同时检测生物样本中钩吻素甲、钩吻素子和钩吻素己的方法,其特征在于:所述肌肉组织样本进行前处理方法:将肌肉组织搅碎后,按1g/3~5mL加入生理盐水中浸泡,再加入乙腈,乙腈相对加入量为8~12mL每克肌肉组织,超声20~40min,离心,取上清液。
6.根据权利要求1~5任一项所述的基于二维液相色谱同时检测生物样本中钩吻素甲、钩吻素子和钩吻素己的方法,其特征在于:色谱柱:
一维柱为ASTON SXI 3.5*25mm*5μm柱,捕集柱为ASTON SN 4.6*10mm*5μm柱,二维柱为ASTON BPR2 4.6*10mm*5μm柱;
进样体积100~500μL;
流速:0.8~1.2mL/min;
流动相:
A泵:A相为乙腈/水混合溶液,V乙腈/V水=80:20;B相为采用氨水调pH至7.5的10mM磷酸二氢铵溶液;C相为采用磷酸调节pH至3.0的10mM的磷酸二氢铵溶液;D相为甲醇/水混合溶液,V甲醇/V水=80:20;
B泵:水;
C泵:乙腈:水:采用氨水调pH至7.5的10mM磷酸二氢铵溶液,三者的体积比为56:14:30;
UV检测器:ch1 254nm;ch2 263nm;
柱温:40℃。