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专利号: 2017104440733
申请人: 湖南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:无效专利
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.从钩吻中分离提纯钩吻绿碱、钩吻碱戊、钩吻素子、钩吻素甲和呋喃钩吻素子的方法,其特征在于:

包括以下步骤:

1)将钩吻粉碎后,依次进行酸水提取、中和及干燥,得到酸提取物;

所述酸提取物依次进行有机溶剂提取、沉降及离心分离,得到浸膏I,所述浸膏I经过热水溶解、冷冻干燥,得到粉末;

2)所述粉末采用硅胶柱分离,硅胶柱分离过程中以二氯甲烷-甲醇溶液为洗脱剂进行梯度洗脱,依次分别收集含相同成分的馏分,并减压蒸馏,分别得到含钩吻绿碱的浸膏II、含钩吻碱戊的浸膏III、含钩吻素子的浸膏IV、含钩吻素甲的浸膏V和含呋喃钩吻素子的浸膏VI;

3)所述浸膏II采用硅胶柱纯化和凝胶柱脱色,得到钩吻绿碱;硅胶柱纯化过程中以二氯甲烷-甲醇-氨水溶液为洗脱剂,凝胶柱脱色过程以甲醇为洗脱剂;

4)所述浸膏III采用硅胶柱纯化,得到钩吻碱戊;硅胶柱纯化过程中以二氯甲烷-甲醇-氨水溶液为洗脱剂;

5)所述浸膏IV采用硅胶柱纯化,得到钩吻素子;硅胶柱纯化过程中以二氯甲烷-甲醇-氨水溶液为洗脱剂;

6)所述浸膏V采用硅胶柱纯化,得到钩吻素甲;硅胶柱纯化过程中以二氯甲烷-甲醇-氨水溶液为洗脱剂;

7)所述浸膏VI采用硅胶柱纯化,得到呋喃钩吻素子;硅胶柱纯化过程中以二氯甲烷-甲醇-氨水溶液为洗脱剂。

2.根据权利要求1所述的从钩吻中分离提纯钩吻绿碱、钩吻碱戊、钩吻素子、钩吻素甲和呋喃钩吻素子的方法,其特征在于:所述酸水提过取过程为:固液比为1:6~10kg/L,提取液为无机酸溶液,提取时间为20~28h,提取次数为2~3次。

3.根据权利要求1所述的从钩吻中分离提纯钩吻绿碱、钩吻碱戊、钩吻素子、钩吻素甲和呋喃钩吻素子的方法,其特征在于:所述有机溶剂提取过程为:固液比为1:1~2kg/L,提取液为甲酸、乙醇、甲醇、二氯甲烷、乙二醇、正己烷、石油醚中至少一种,提取温度为回流温度,提取时间为1~3h,提取次数为2~3次。

4.根据权利要求1所述的从钩吻中分离提纯钩吻绿碱、钩吻碱戊、钩吻素子、钩吻素甲和呋喃钩吻素子的方法,其特征在于:所述浸膏I采用45~55℃热水溶解后,在-20℃以下温度下冷冻干燥24~48h得到干燥粉末。

5.根据权利要求1~4任一项所述的从钩吻中分离提纯钩吻绿碱、钩吻碱戊、钩吻素子、钩吻素甲和呋喃钩吻素子的方法,其特征在于:步骤2)的梯度洗脱过程中在二氯甲烷-甲醇体积比为9:1时,依次收集到含钩吻绿碱、钩吻碱戊、钩吻素子和钩吻素甲馏分,在二氯甲烷-甲醇体积比为7:3时,收集含呋喃钩吻素子的馏分。

6.根据权利要求1~4任一项所述的从钩吻中分离提纯高纯钩吻绿碱、钩吻碱戊、钩吻素子、钩吻素甲和呋喃钩吻素子的方法,其特征在于:步骤3)中,所述浸膏II先采用40*

600mm硅胶柱,以体积比为95:5:1/20~90:10:1/20的二氯甲烷-甲醇-氨水溶液为洗脱剂进行洗脱,收集含钩吻绿碱的馏分,减压蒸馏,得浸膏II-1;所述浸膏II-1采用25*500mm硅胶柱,以体积比为20:0.8:1/20的二氯甲烷-甲醇-氨水溶液为洗脱剂进行洗脱,收集含钩吻绿碱的馏分,减压蒸馏,得浸膏II-2;所述浸膏II-2采用20*1800mm凝胶柱,以纯甲醇洗脱剂,收集含钩吻绿碱的馏分,减压蒸馏,得浸膏II-3;所述浸膏II-3采用10*400mm硅胶柱,以体积比为19:0.7:1/20的二氯甲烷-甲醇-氨水溶液为洗脱剂进行洗脱,收集含钩吻绿碱的馏分,减压蒸馏,得纯度在98%以上的钩吻绿碱。

7.根据权利要求1~4任一项所述的从钩吻中分离提纯钩吻绿碱、钩吻绿碱、钩吻碱戊、钩吻素子、钩吻素甲和呋喃钩吻素子的方法,其特征在于:步骤4)中,所述浸膏III先采用

40*600mm硅胶柱,以体积比为95:5:1/20~90:10:1/20的二氯甲烷-甲醇-氨水溶液为洗脱剂进行洗脱,收集含钩吻碱戊的馏分,减压蒸馏,得浸膏III-1;所述浸膏III-1采用25*

500mm硅胶柱,以体积比为20:0.8:1/20的二氯甲烷-甲醇-氨水溶液为洗脱剂进行洗脱,收集含钩吻碱戊的馏分,减压蒸馏,得纯度在96%以上的钩吻碱戊。

8.根据权利要求1~4任一项所述的从钩吻中分离提纯钩吻绿碱、钩吻碱戊、钩吻素子、钩吻素甲和呋喃钩吻素子的方法,其特征在于:步骤5)中,所述浸膏IV先采用40*600mm硅胶柱,以体积比为95:5:1/20~90:10:1/20的二氯甲烷-甲醇-氨水溶液为洗脱剂进行洗脱,收集含钩吻素子的馏分,减压蒸馏,得浸膏IV-1;所述浸膏IV-1采用25*500mm硅胶柱,以体积比为20:0.8:1/20的二氯甲烷-甲醇-氨水溶液为洗脱剂进行洗脱,收集含钩吻素子的馏分,减压蒸馏,得纯度在98%以上的钩吻素子。

9.根据权利要求1~4任一项所述的从钩吻中分离提纯钩吻绿碱、钩吻碱戊、钩吻素子、钩吻素甲和呋喃钩吻素子的方法,其特征在于:步骤6)中,所述浸膏V采用40*600mm硅胶柱,以体积比为95:5:1/20~90:10:1/20的二氯甲烷-甲醇-氨水溶液为洗脱剂进行洗脱,收集含钩吻素甲的馏分,减压蒸馏,得纯度在92%以上的钩吻素甲。

10.根据权利要求1~4任一项所述的从钩吻中分离提纯钩吻绿碱、钩吻碱戊、钩吻素子、钩吻素甲和呋喃钩吻素子的方法,其特征在于:步骤7)中,所述浸膏VI先采用40*600mm硅胶柱,以体积比为95:5:1/20的二氯甲烷-甲醇-氨水溶液为洗脱剂进行洗脱,收集含呋喃钩吻素子的馏分,减压蒸馏,得93%以上呋喃钩吻素子。