1.一种测定钩吻中的钩吻碱和钩吻碱子的方法,其特征在于,依次包括下述步骤:
1)制备供试液
11)称取粉碎后样品2g,放入150mL锥形瓶中,加入5mL12%碳酸和5mL2%乙酸,超声提取12min,过滤;
12)净化依次用5mL环己醇和2mL甲醇活化PCX固相萃取柱,准确移取5mL滤液上柱,再用
2mL甲醇和5mL环己醇淋洗固相萃取柱,抽干,用12mL3%氨化环己醇溶液洗脱,收集洗脱液,洗脱液于30℃下吹至干,1mL丙酮定容,作为供试液;
2)测定
将步骤1)制备的供试液上气质联用仪测定,钩吻碱子和钩吻碱的保留时间分别是
15min和17min;
3)与标准谱图的匹配结果
钩吻碱与NIST 08标准谱库中钩吻碱匹配度为93.8%,钩吻碱子的质谱谱图能与文献中钩吻碱子的质谱谱图高度相似;
4)同位素峰形校正检索技术识别目标物的精确分子质量
先选取全氟三丁胺的已知离子生成校正函数,再利用该校正函数校正目标物精确分子质量和同位素峰形,从而获得其分子式,保留时间为15min的目标物分子式检索首位为C20H22N2O,与钩吻碱子的分子式一致;保留时间为17min的目标物分子式检索首位为C20H22N2O2,与钩吻碱的分子式一致;
所述的色谱条件为:色谱柱:HP-5MS 0.25mm×40m×0.25μm石英毛细管柱;载气:高纯He,流速:1.5mL·min-1,程序升温:初始温度为160℃,保持3min,然后12℃·min-1升至200℃,保持5min,进样口温度:200℃,分流 进样,分流比为30:1,进样量为1.0μL;
所述的质谱条件为:离子源为电子轰击源70ev;离子源温度200℃,接口温度200℃,四级杆温度160℃,质量范围m/z 30~350,采样模式:原始扫描,以全氟三丁胺标准品为外标对质谱进行校正。