1.钩吻中多种有效成分同时检测的液相色谱-串联质谱定量方法,其特征在于:以钩吻素甲甲醇溶液、钩吻素子甲醇溶液、钩吻素己甲醇溶液和钩吻碱戊甲醇溶液为对照样本溶液,以钩吻提取液为待测样本溶液,采用高效液相色谱三重四级杆质谱仪检测,根据检测结果计算待测样本溶液中多种有效成分的含量。
2.根据权利要求1所述的钩吻中多种有效成分同时检测的液相色谱-串联质谱定量方法,其特征在于:所述待测样本溶液的制备方法为:钩吻粉末采用质量百分比浓度为75~
85%的乙醇在55~65℃温度下超声处理20~40min,过滤,收集滤液,重复上述操作一次,合并两次滤液,取1mL滤液采用氮吹后,加入同等体积初始流动相复溶,过0.22μm微孔滤膜,得到待测样本溶液。
3.根据权利要求2所述的钩吻中多种有效成分同时检测的液相色谱-串联质谱定量方法,其特征在于:所述钩吻粉末包括钩吻全草、根、茎、叶中至少一种粉末。
4.根据权利要求1所述的钩吻中多种有效成分同时检测的液相色谱-串联质谱定量方法,其特征在于:所述高效液相色谱条件为:
色谱柱为Waters C18色谱柱;
流动相A为4~6mM乙酸铵溶液,流动相B为乙腈,流速为0.2~0.4mL/min,柱温为25~35℃,进样量为5~15μL;
采用梯度洗脱程序:
0~2min内,流动相A和流动相B的体积比为90:10;
2~7min内,流动相A和流动相B的体积比由90:10匀速变至85:15;
7~20min内,流动相A和流动相B的体积比为85:15;
20~30min内,流动相A和流动相B的体积比由85:15匀速变至10:90;
30~33min内,流动相A和流动相B的体积比为10:90;
33~40min内,流动相A和B的体积比为90:10。
5.根据权利要求4所述的钩吻中多种有效成分同时检测的液相色谱-串联质谱定量方法,其特征在于:色谱柱为C18色谱柱,口径4.6mm×柱长150mm,粒径5μm;
流动相A为5mM乙酸铵溶液,流动相B为乙腈,流速为0.3mL/min,柱温为20℃,进样量为5μL。
6.根据权利要求5所述的钩吻中多种有效成分同时检测的液相色谱-串联质谱定量方法,其特征在于:所述乙酸铵溶液的pH为5.2。
7.根据权利要求1所述的钩吻中多种有效成分同时检测的液相色谱-串联质谱定量方法,其特征在于:所述质谱条件为:离子源为ESI离子源,检测方式为正离子检测,扫描方式为多重反应监测,脱溶剂温度为330~340℃,毛细管电压为2500V~3500V,喷雾器压力为35~45Psi,去溶剂气体为N2,N2的流速为10~15L/min。
8.根据权利要求7所述的钩吻中多种有效成分同时检测的液相色谱-串联质谱定量方法,其特征在于:所述质谱条件为:离子源为ESI离子源,检测方式为正离子检测,扫描方式为多重反应监测,脱溶剂温度为335℃,毛细管电压为3000V,喷雾器压力为40Psi,去溶剂气体为N2,N2流速为12L/min。
9.根据权利要求1~8任一项所述的钩吻中多种有效成分同时检测的液相色谱-串联质谱定量方法,其特征在于:对不同浓度的钩吻素甲甲醇溶液、钩吻素子甲醇溶液、钩吻素己甲醇溶液和钩吻碱戊甲醇溶液为对照样本溶液进行检测,建立各对照样本溶液浓度与峰面积的关系,采用加权1/X2最小二乘法进行回归计算,求得的线性回归方程与相关系数;再对待测样本溶液进行检测,并根据检测结果计算待测样本溶液中多种有效成分的含量;其中,X为对照样本溶液浓度,单位为μg/mL。
10.根据权利要求9所述的钩吻中多种有效成分同时检测的液相色谱-串联质谱定量方法,其特征在于:所述有效成分包括生物碱类、环烯醚萜类和酚酸类。