1.颠茄WRKY类转录因子基因,其特征在于:所述颠茄WRKY类转录因子基因的核苷酸序 列如SEQ ID NO.3所示。
2.根据权利要求1所述颠茄WRKY类转录因子基因,其特征在于:所述颠茄WRKY类转录因 子基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。
3.含有权利要求1所述颠茄WRKY类转录因子基因的重组植物表达载体,其特征在于:所述重组植物表达载体由 SEQ ID NO.3所示核苷酸序列连入pBI121载体的BamH1和Sac1酶切位点处制得。
4.权利要求1~2任一项所述颠茄WRKY类转录因子基因或权利要求3所述重 组植物表达载体在提高颠茄生物碱含量中的应用,其特征在于:所述生物碱为东莨菪碱。
5.一种提高颠茄生物碱含量的方法,其特征在于,包括如下步骤:通过在颠茄中过量表达颠茄WRKY类转录因子基因,所述颠茄WRKY类转录因子基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3 所示,所述生物碱为东莨菪碱。
6.根据权利要求5所述提高颠茄生物碱含量的方法,其特征在于,在颠茄中过量表达颠 茄WRKY类转录因子基因的方法如下:克隆颠茄WRKY类转录因子基因,然后构建植物表达载 体,获得含有颠茄WRKY类转录因子基因的重组植物表达载体,再将获得的重组植物表达载 体转化发根农杆菌获得工程菌,最后用工程菌转化颠茄,筛选颠茄毛状发根,扩大培养,PCR 筛选阳性植株,获得生物碱含量提高的颠茄毛状发根。
7.根据权利要求6所述提高颠茄生物碱含量的方法,其特征在于,克隆颠茄WRKY类转录 因子基因的方法为:以颠茄cDNA为模板,SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示序列为引物进行 PCR扩增,电泳检测,回收,获得颠茄WRKY类转录因子基因。
8.根据权利要求6所述提高颠茄生物碱含量的方法,其特征在于,所述重组植物表达载体为将SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列连入pBI121载体BamH1和Sac1酶切位点处而得。