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专利号: 2016108882019
申请人: 福建省农业科学院植物保护研究所
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-27
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1. 一种辣椒黑点炭疽病菌分子检测引物,其特征在于:引物的核苷酸序列为:上游引物CAF:5’-CTATAACTGTTGCTTCGGCGG-3’下游引物CAR:5’-TCCCAGTGCGAGACGTAAAG-3’。

2.根据权利要求1所述的辣椒黑点炭疽病菌分子检测引物,其特征在于,所述上游引物CAF和下游引物CAR对辣椒黑点炭疽病菌特异性扩增出406bp的产物。

3.一种利用权利要求1所述引物检测辣椒黑点炭疽病菌的快速分子检测方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)提取辣椒叶片或辣椒果实的DNA;

(2) 以提取的辣椒叶片或辣椒果实DNA为模板进行PCR扩增:PCR反应体系25μL,包含

2.5μL 10×PCR buffer,2.0μL浓度为2.5mmol/L的dNTP Mixture,0.15μL浓度为5U/μL的Taq酶,10μmol/L的CAF和CAR各0.5μL,DNA模板1μL,加ddH2O至总体积达25μL;PCR反应条件为:94℃预变性5min;94℃变性40sec,55℃退火45sec,72℃延伸45sec,共35个循环;72℃延伸10min;

(3)上步所得的PCR产物在1.0%琼脂糖凝胶上用0.5×TBE缓冲液电泳分析,电压为4-

5V/cm;根据扩增产物的大小判定检测结果,如果能特异性扩增出406bp的产物,则可判定辣椒叶片或辣椒果实存在辣椒黑点炭疽病菌。

4.如权利要求1所述的引物在田间辣椒黑点炭疽病菌的早期诊断和病菌的监测鉴定中的应用。