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专利号: 2016108881798
申请人: 福建省农业科学院植物保护研究所
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-27
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1. 一种桃炭疽病菌分子检测引物,其特征在于:引物的核苷酸序列为:上游引物PCGF:5’-TACCTAACCGTTGCTTCGGC-3’下游引物PCGR:5’-CCCAGTGCGAGACGTTAGTT-3’。

2.根据权利要求1所述桃炭疽病菌分子检测引物,其特征在于,所述上游引物PCGF和下游引物PCGR对桃炭疽病菌特异性扩增出420bp的产物。

3.一种桃炭疽病菌的快速检测方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)提取桃叶片或桃果实的DNA;

(2) 以提取的桃叶片或桃果实DNA为模板进行PCR扩增:PCR反应体系25μL,包含2.5μL 

10×PCR buffer,2.0μL浓度为2.5mmol/L的dNTP Mixture,0.15μL浓度为5U/μL的Taq酶,10μmol/L的权利要求1中所述的PCGF和PCGR各0.5μL,DNA模板1μL,加ddH2O至总体积达25μL;

PCR反应条件为:94℃预变性5min;94℃变性40sec,55℃退火45sec,72℃延伸45sec,共35个循环;72℃延伸10min;

(3)上步所得的PCR产物在1.0%琼脂糖凝胶上用0.5×TBE缓冲液电泳分析,电压为4-

5V/cm;根据扩增产物的大小判定检测结果,如果能特异性扩增出420bp的产物,则可判定桃叶片或果实存在桃炭疽病菌。

4.一种如权利要求1所述引物在田间桃炭疽病菌的早期诊断和病菌的监测鉴定中的应用。