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专利号: 2015109183924
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2024-09-12
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种短小芽孢杆菌漆酶基因cotA,其特征在于,所述基因为在核苷酸序列为SEQ IDNO.1所示的基因的基础上经碱基的突变而成的高温稳定的漆酶基因,所述突变是将氨基酸序列的第57位和第120位突变为Thr。

2.权利要求1所述基因编码的蛋白质。

3.含有权利要求1所述基因的转基因细胞系。

4.含有权利要求1所述基因的基因工程菌。

5.含有权利要求1所述基因的表达载体或克隆载体。

6.根据权利要求4所述的基因工程菌,其特征在于,优选重组大肠杆菌E.coli BL21(DE3)。

7.一种权利要求6所述生产漆酶的重组大肠杆菌的构建方法,其特征在于,选取大肠杆菌冷休克表达载体pColdII,构建重组表达载体pColdII-cotA,以大肠杆菌E.coli BL21(DE3)为宿主进行表达。

8.一种权利要求7所述生产漆酶的重组大肠杆菌生产漆酶的方法,其特征在于,利用IPTG对重组菌产漆酶进行诱导表达;所述诱导表达条件为IPTG诱导终浓度为0.1mM,诱导温度15℃,诱导时间24h,转速160rpm;培养基成分为:胰蛋白胨10g/L,酵母提取物5g/L,氯化钠10g/L,pH 7.4。

9.权利要求1所述基因在印染废水脱色中的应用。