1.一种梯度胶,其特征在于,所述梯度胶为SDS-PAGE梯度胶,所述SDS-PAGE梯度胶由轻液和重液组成,所述轻液和重液均由以下成分(以体积百分比计)组成:凝胶缓冲液(3.5×):20-35%;A液:15-70%,双蒸水:0-60%,甘油:0-15%,AP:0.15-0.40%,TEMED:
0.015-0.04%,且所述轻液和重液组成成分及含量不同。
2.根据权利要求1所述的一种梯度胶,其特征在于,所述凝胶缓冲液是通过将262g Bis-Tris溶于去矿物质水配制成1L的标准液,pH为6.2-6.6。
3.根据权利要求1所述的一种梯度胶,其特征在于,所述A液为30%的Acr-Bis水溶液,其中Acr与Bis的质量比为19:1。
4.根据权利要求1或2或3所述的一种梯度胶,其特征在于,所述梯度胶为4%-20%SDS-PAGE梯度胶。
5.根据权利要求4所述的一种梯度胶,其特征在于,所述4%-20%SDS-PAGE梯度胶的轻液由以下成分组成:凝胶缓冲液(3.5×):23mL;A液:14mL,双蒸水:43mL,AP:300μL,TEMED:30μL;重液由以下成分组成:凝胶缓冲液(3.5×):20mL;A液:46mL,甘油:4mL,AP:
200μL,TEMED:20μL。
6.根据权利要求1或2或3所述的一种梯度胶,其特征在于,所述梯度胶为8%-16%SDS-PAGE梯度胶。
7.根据权利要求6所述的一种梯度胶,其特征在于,所述8%-16%SDS-PAGE梯度胶的轻液由以下成分组成:凝胶缓冲液(3.5×):20mL;A液:15mL,双蒸水:39mL,AP:135μL,TEMED:13μL;重液由以下成分组成:凝胶缓冲液(3.5×):20mL;A液:30mL,双蒸水:
7.5mL,甘油:7.5mL,AP:135μL,TEMED:13μL。
8.一种梯度胶的制备方法,其特征在于,所述制备方法主要包括胶液配制、灌胶、清洗、聚合、拆胶、修整和封装;
其中,所述胶液配制是按上述配方配制梯度胶的轻液和重液,其中,TEMED和AP在灌胶前加入,且添加顺序依次为TEMED、AP;
所述灌胶的具体过程为:将配制好的梯度胶的轻液、重液置于梯度混合仪相应容器内,同时打开磁力搅拌器进行搅拌,然后排除灌胶管内气体后当重液和轻液的高度一致时,打开梯度混合仪中间的阀门进行灌胶,液体达到顶部后关闭。
9.根据权利要求8所述的一种梯度胶的制备方法,其特征在于,所述封装是将修整后的梯度胶进行真空封装后置于4-8℃进行保存,且封装时加入300-500μL储存缓冲液。
10.根据权利要求9所述的一种梯度胶的制备方法,其特征在于,所述储存缓冲液由以下成分(以体积百分比计)组成:凝胶缓冲液(3.5×):20-35%;甘油:1-8%,100mmol/L的EDTA:0.1-5%,余量为去矿物质水。