本发明涉及荧光探针应用技术领域,具体涉及一种谷胱甘肽荧光探针及其应用,本发明构建选择特异性检测谷胱甘肽GSH的荧光探针具有重大的医学和生物学意义,该探针具有合适的Kd值(0.86mM)、无毒、安全性高,对肿瘤细胞、肝细胞、巨噬细胞没有毒性,抗干扰能力强、特异性高,具有良好的组织穿透性,能较好地检测细胞内源性和外源性的GSH,并且不受Cys、Hcy等干扰对GSH的特异性高、生物相容性好等特点,已成功用于HeLa细胞内源性GSH的检测。本发明因其简便高效实时快捷的优点可广泛应用于生物硫醇分子检测中,在高选择性、高灵敏度的检测和可视化追踪生物系统中,该探针生物硫醇化合物的动态浓度意义重大,可响应细胞内氧化应激引起的GSH的变化。