本发明公开了一种水溶性镧系AIE荧光纳米粒子的制备方法,将AIE和稀土离子的优势有效结合,以含三联吡啶结构的TPE小分子衍生物TPE‑3N作为第一配体,11,10‑邻菲啰啉作为第二配体,第三配体PAA作为水溶性单元,与稀土离子Eu进行配位,得到镧系配合物TPNE,最后通过自组装得到水溶性镧系AIE荧光纳米粒子TPNE NPs。TPNE NPs的水溶液在435 nm和615 nm附近发射蓝/红双荧光,分别来源于AIE小分子TPE和Eu稀土配合物的荧光发射。同时,TPNE NPs具有温度响应性和低细胞毒性,TPNE NPs具有对MKN‑45癌细胞优异的膜靶向成像能力,并展现出可逆双色荧光成像效果。并且,TPNE NPs在活体生物斑马鱼中同样表现出优异的可逆双色荧光成像效果,可作为一种具有潜力的可逆双色生物荧光探针。