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专利号: 2024119109029
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-08-19
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种浙产金线莲多糖,其特征在于,所述浙产金线莲多糖选自AZJP‑1a、AZJP‑2a、AZJP‑2b、AZJP‑2c;

AZJP‑1a由Manp‑(1→,Galp‑(1→,→4)‑Galp‑(1→,→4)‑Manp‑(1→,→3,4)‑Manp‑(1→和→4,6)‑Manp‑(1→组成;半乳糖含量2.83%,甘露糖含量96.10%;AZJP‑1a的相对分子量为387.083kDa;

AZJP‑2a由Araf‑(1→,Arap‑(1→,→3)‑Araf‑(1→,Glcp‑(1→,Galp‑(1→,→4)‑ Galp‑(1→,→4)‑ Glcp‑(1→,→3)‑Galp‑(1→,→3,4)‑Glcp‑(1→,→2,4)‑Glcp‑(1→,→

4,6)‑Galp‑(1→和→3,6)‑Galp‑(1→组成;葡萄糖含量19.47%,半乳糖含量53.22%,阿拉伯糖含量23.46%;AZJP‑2a的相对分子量为947.069kDa;

AZJP‑2b由Glcp‑(1→,→4)‑Galp‑(1→,→4)‑Glcp‑(1→,→3,4)‑Galp‑(1→和→4,

6)‑Glcp‑(1→组成;葡萄糖含量84.17%,半乳糖含量11.32%,阿拉伯糖含量3.52%;AZJP‑2b的相对分子量为3.989kDa;

AZJP‑2c由Glcp‑(1→,→4)‑Galp‑(1→,→4)‑Glcp‑(1→,→3,4)‑Glcp‑(1→和→4,

6)‑Glcp‑(1→组成;葡萄糖含量97.52%;AZJP‑2c的相对分子量为3.045kDa。

2.如权利要求1所述浙产金线莲多糖,其特征在于,按如下方法分离获得:

S1、取浙产金线莲原药材,粉碎后进行水提、醇沉,收集多糖沉淀复溶于水,得到多糖原始溶液;

S2、将多糖原始溶液依次进行CaCl2‑NaOH法脱蛋白、活性炭法脱色、透析、冷冻干燥,得到粗多糖AZJP;

S3、采用DEAE‑cellulose‑52阴离子交换柱填料对粗多糖AZJP进行初步分离,以0.0‑

0.1mol/L的NaCl水溶液为洗脱剂进行梯度洗脱,用苯酚硫酸法进行监测并绘制流出曲线,根据流出曲线合并各组分的洗脱液,经减压浓缩、透析、冷冻干燥,得到多糖AZJP‑1、AZJP‑

2;

S4、采用凝胶渗透色谱填料Sephadex G‑200对多糖AZJP‑1进行分离,以0.15‑0.25mol/L的NaCl水溶液为洗脱剂进行洗脱,用苯酚硫酸法进行监测并绘制流出曲线,根据流出曲线合并各组分的洗脱液,经减压浓缩、透析、冷冻干燥,得到浙产金线莲多糖AZJP‑1a;多糖AZJP‑2用同样的方法进行分离,得到浙产金线莲多糖AZJP‑2a、AZJP‑2b、AZJP‑2c。

3.如权利要求2所述浙产金线莲多糖,其特征在于,S1操作如下:取浙产金线莲原药材,粉碎后过50目筛,将药材粉末与水按料液比1g:10‑30mL混合,加热至90‑110℃提取1.5‑

2.5h,过滤,滤渣重复提取1‑2次,合并提取液,减压浓缩,离心,取上清液,加入乙醇,4℃醇沉8‑12h,离心收集多糖沉淀,复溶于水,得到多糖原始溶液。

4.如权利要求2所述浙产金线莲多糖,其特征在于,S2操作如下:取多糖原始溶液,用NaOH溶液调节pH=8‑9,加热至80‑90℃,加入CaCl2固体至终浓度40‑60g/L,煮沸25‑35min,冷却至室温,过滤,用盐酸调节滤液pH=6‑8,加入无水乙醇,放置8‑12h,离心,收集沉淀,加水溶解重复上述操作,直至蛋白质含量低于5%;将脱蛋白后的沉淀物用水复溶,加入活性炭,45‑55℃下搅拌脱色35‑45min,随后离心除去活性炭;将脱色后的溶液转移至截留分子量3500Da的透析袋内,在3‑5℃下透析24‑72h,之后冷冻干燥,得到粗多糖AZJP。

5.如权利要求2所述浙产金线莲多糖,其特征在于,S3操作如下:将粗多糖AZJP溶于蒸馏水中,配制成5‑15mg/mL的AZJP溶液,用0.45μm水系微孔滤膜过滤后加至装有DEAE‑cellulose‑52填料的色谱柱进行分离,上样量5‑15mL,依次使用0.0、0.1mol/L的NaCl水溶液为洗脱剂进行梯度洗脱,流速1‑2mL/min,用苯酚硫酸法进行监测并绘制流出曲线,根据流出曲线合并各组分的洗脱液,经减压浓缩、3‑5℃透析24‑72h、冷冻干燥,得到多糖AZJP‑

1、AZJP‑2。

6.如权利要求2所述浙产金线莲多糖,其特征在于,S4操作如下:使用Sephadex G‑200色谱柱分别对多糖AZJP‑1、AZJP‑2进行分离,上样浓度5‑15mg/mL,上样量5‑20mL,以0.15‑

0.25mol/L的NaCl水溶液为洗脱剂进行洗脱,流速0.2‑0.8mL/min,用苯酚硫酸法进行监测并绘制出流出曲线,根据流出曲线合并各组分的洗脱液,经减压浓缩,3‑5℃透析24‑72h,冷冻干燥,获得浙产金线莲多糖AZJP‑1a、AZJP‑2a、AZJP‑2b、AZJP‑2c。

7.如权利要求1所述浙产金线莲多糖在制备软骨损伤修复药物中的应用。