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专利号: 2023118176159
申请人: 西南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-10-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种基于亲和释放的脂质体修饰物的筛选方法,其特征在于,所述筛选方法如下所示:

(1)将蛋黄卵磷脂和待筛选的化合物按照10:1~4的质量比混合,溶解到氯仿和甲醇按照1:1~3的质量比形成的混合有机溶剂中,转移到容器中除去有机溶剂后在容器底部形成脂质体薄膜;

(2)将步骤(1)中制备的脂质体薄膜固定于表面等离子共振上经过活化处理的LIP‑1芯片上,随后分别注入不同浓度的两性霉素B溶液,经过等离子共振检测后通过拟合得到待筛选的化合物与两性霉素B之间的KD值,KD值介于KD麦角固醇与KD胆固醇之间且具有显著倍数差异的待筛选的化合物即可作为基于亲和释放的脂质体修饰物;

所述KD麦角固醇为麦角固醇和蛋黄卵磷脂形成的麦角固醇修饰的脂质体后与两性霉素B的KD值,所述KD胆固醇为胆固醇和蛋黄卵磷脂形成的胆固醇修饰脂质体后与两性霉素B的KD值;

所述不同浓度的取值范围为20~100μM;所述KD为解离平衡常数。

2.根据权利要求1所述的筛选方法,其特征在于,所述待筛选的材料为甾醇类化合物。

3.根据权利要求2所述的筛选方法,其特征在于,所述甾醇类化合物包括维生素化合物VD2、维生素化合物VD3、桦木脑、豆甾醇、熊果酸、齐墩果酸、羊毛甾醇、β‑谷甾醇、7‑脱氢胆固醇、25‑羟基胆固醇、27‑羟基胆固醇、人参皂苷Rg3、人参皂苷Rh2、人参皂苷Rg5、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rh1、人参皂苷Rh4、人参皂苷CK、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1或人参皂苷Rk1中的任意一种或者几种。

4.根据权利要求1所述的筛选方法,其特征在于,所述等离子共振检测过程中流动相为浓度为0.01M、pH=7.4的PBS缓冲溶液且所述缓冲溶液中含有质量分数为5%的DMSO、流动相的流速为20μL/min。

5.根据权利要求1所述的筛选方法,其特征在于,所述活化的具体方法为:将LIP‑1芯片浸没在HBS缓冲液后取出,用超纯水冲洗表面后安装于流通池中,继续用20mM的CHAPS溶液活化LIP‑1芯片即可。

6.根据权利要求1所述的筛选方法,其特征在于,所述KD采用Tracedrawer软件拟合得到。