利索能及
我要发布
收藏
专利号: 2023111385401
申请人: 湖南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一对油菜根肿菌单克隆抗体,其特征在于,包括油菜根肿菌单克隆抗体PBR‑1和油菜根肿菌单克隆抗体PBR‑2;

分泌油菜根肿菌单克隆抗体PBR‑1的杂交瘤细胞株为小鼠B细胞杂交瘤细胞系PB103‑

1、分泌油菜根肿菌单克隆抗体PBR‑2的杂交瘤细胞株为小鼠B细胞杂交瘤细胞系PB103‑2;

所述小鼠B细胞杂交瘤细胞系PB103‑1保藏于广东省微生物菌种保藏中心,分类名为小鼠杂交瘤细胞,保藏号为GDMCC No:63637,保藏日期为2023年7月12日,保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼;小鼠B细胞杂交瘤细胞系PB103‑2保藏于广东省微生物菌种保藏中心,分类名为小鼠杂交瘤细胞,保藏号为GDMCC No: 63638,保藏日期为2023年7月12日,保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。

2.分泌权利要求1所述的油菜根肿菌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其特征在于:分泌油菜根肿菌单克隆抗体PBR‑1的杂交瘤细胞株为小鼠B细胞杂交瘤细胞系PB103‑1、分泌油菜根肿菌单克隆抗体PBR‑2的杂交瘤细胞株为小鼠B细胞杂交瘤细胞系PB103‑2;所述小鼠B细胞杂交瘤细胞系PB103‑1保藏于广东省微生物菌种保藏中心,分类名为小鼠杂交瘤细胞,保藏号为GDMCC No:63637,保藏日期为2023年7月12日,保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼;小鼠B细胞杂交瘤细胞系PB103‑2保藏于广东省微生物菌种保藏中心,分类名为小鼠杂交瘤细胞,保藏号为GDMCC No: 63638,保藏日期为2023年7月12日,保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。

3.基于权利要求1所述的油菜根肿菌单克隆抗体的胶体金检测试纸条,包括PVC底板,PVC底板上依次设有样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸水滤纸,硝酸纤维素膜上设有检测线和质控线,其特征在于:所述胶体金垫上涂布有胶体金标记的油菜根肿菌单克隆抗体PBR‑1和鸡IgY;检测线为油菜根肿菌单克隆抗体PBR‑2,质控线为羊抗鸡IgY。

4.根据权利要求3所述的基于油菜根肿菌单克隆抗体的胶体金检测试纸条,其特征在于:所述胶体金垫上油菜根肿菌单克隆抗体PBR‑1的浓度为10µg/mL、鸡IgY的浓度为10µg/mL。

5.根据权利要求4所述的基于油菜根肿菌单克隆抗体的胶体金检测试纸条,其特征在于:所述检测线上油菜根肿菌单克隆抗体PBR‑2的浓度为1.5mg/mL。

6.根据权利要求5所述的基于油菜根肿菌单克隆抗体的胶体金检测试纸条,其特征在于:所述质控线上羊抗鸡IgY的浓度为1.5mg/mL。

7.权利要求3‑6任一项所述的胶体金检测试纸条的制备方法,其特征在于,步骤为:

(1)利用柠檬酸钠还原氯金酸法,当反应溶液变成紫红色时,即得胶体金溶液;

(2)胶体金溶液经调pH后加入油菜根肿菌单克隆抗体PBR‑1和鸡IgY,搅拌后加入5%牛血清蛋白,继续搅拌、静置、离心弃上清得胶体金标记的油菜根肿菌单克隆抗体PBR‑1和鸡IgY;

(3)将步骤(2)的胶体金标记的油菜根肿菌单克隆抗体PBR‑1和鸡IgY溶液涂布在胶体金垫上,烘干得胶体金垫;

(4)将检测抗体油菜根肿菌单克隆抗体PBR‑2溶液和羊抗鸡IgY溶液分别喷涂至硝酸纤维素膜的检测线和质控线的位置,烘干得处理后的硝酸纤维素膜;

(5)将样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸水滤纸分别粘贴在PVC底板上,制备成胶体金大板,裁剪后即得胶体金检测试纸条。

8.根据权利要求7所述的胶体金检测试纸条的制备方法,其特征在于:所述步骤(2)中pH为8.4;胶体金溶液中油菜根肿菌单克隆抗体PBR‑1和鸡IgY的终浓度均为10µg/mL。

9.根据权利要求8所述的胶体金检测试纸条的制备方法,其特征在于:所述胶体金溶液与牛血清蛋白的体积比为25:6。

10.根据权利要求9所述的胶体金检测试纸条的制备方法,其特征在于:所述步骤(4)中油菜根肿菌单克隆抗体PBR‑2溶液和羊抗鸡IgY溶液的浓度均为1.5mg/mL。