1.Abcg4基因在构建脑动脉粥样硬化伴肺部增大小鼠模型中的应用,其特征在于,所述应用具体是通过敲除小鼠体内Abcg4基因,获得所述脑动脉粥样硬化伴肺部增大小鼠模型。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述小鼠为C57BL/6J小鼠。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述脑动脉粥样硬化伴肺部增大小鼠模型的构建方法包括如下步骤:S1、以野生型C57BL/6J小鼠基因组为模板,以引物对I扩增包含Abcg4基因第6外显子至部分第7外显子的片段,记作片段I;
以引物对II扩增包含Abcg4基因第9‑14外显子的片段,记作片段II;
S2、将片段I插入到pCRII载体的eGFP编码区前,获得融合片段I,将融合片段I插入到靶向载体OSDUPDEL的多克隆位点A,将片段II插入到同一个靶向载体OSDUPDEL的多克隆位点B,获得靶向重组载体;
S3,上述重组载体经注射胚胎干细胞进行同源重组后,获得ES细胞打靶产物,对ES细胞打靶产物进行阳性克隆鉴定,筛选出正向敲除的ES细胞;
S4,将S3筛选出的ES细胞注射到C57BL/6J小鼠囊胚中并植入假孕母鼠体内,获得具有种系传递能力的杂合子代小鼠;
S5,将上述杂合子代小鼠与C57BL/6J小鼠进行N代的回交,产生Abcg4基因重要功能部位缺陷鼠种系,杂合子相互交配,生成Abcg4基因缺陷型小鼠,即所述脑动脉粥样硬化伴肺部增大小鼠模型。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述引物对II的核苷酸序列为:FI:5′‑TGGTGGATGGTGCAGATGAC‑3′;
RI:5′‑AAATCGGGGTGGTGCTTAGG3′;
所述引物对II的核苷酸序列为:
FII:5′‑AACTGACGAAGAAGCCGGAG3′;
RII:5′‑ATCAAAGAAGGACTGCCCCG3′。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,S5中,N≥16。