1.一种用于检测AFB1的水凝胶限域光激发比率电化学传感方法，其特征在于，步骤如下：（1）将聚乙二醇、聚乙二醇二丙烯酸酯、2‑羟基‑2‑甲基苯丙酮、丙烯酸酯聚乙二醇羧基和超纯水按一定的比例混合均匀形成水凝胶基质；

（2）将HAuCl4溶液加热至沸腾后加入Na3C6H5O7·2H2O，反应一段时间后溶液的颜色变为鲜红色，即得到金纳米粒子溶液，记为AuNPs溶液；然后，将AuNPs溶液与步骤（1）合成的水凝胶基质混合，得到水凝胶混合基质；

（3）将目标物AFB1的适配体溶液与cDNA溶液混合后进行PCR反应得到双链DNA；然后将双链DNA与MB溶液混合，得到混合溶液，最后再与步骤（2）的水凝胶混合基质混合，得到基于水凝胶的传感基质；

（4）首先配制AFB1标准溶液，然后分别与步骤（3）制备的基于水凝胶的传感基质混合，得到的混合液在室温下孵育，孵育后修饰在ITO表面，经紫外光聚合后获得基于水凝胶空间限域的比率电化学传感器；

（5）在PBS缓冲溶液中加入铁氰化钾溶液作为参比探针，形成电解质溶液；

（6）构建标准曲线：以步骤（4）得到的基于水凝胶空间限域的比率电化学传感器为工作电极，饱和Ag/AgCl为参比电极，铂丝电极为对电极，引入外界光源对电化学传感界面激发，并在激发过程中于电解质溶液中进行电化学测试，每一个浓度的AFB1标准溶液修饰的电极对应获得两个的电化学信号，分别记为IMB和I K3[Fe(CN)6]；根据获得的两个电流值的比值和AFB1浓度对数关系构建标准曲线；

（7）样品中AFB1的检测：首先获取样品液，按照步骤（4）‑（6）的操作，区别仅在于将AFB1标准溶液替换为样品液；最后经电化学测试，得到IMB和IK3[Fe(CN)6]；将两者的比值代入步骤（6）构建的标准曲线，即可获知样品中AFB1的浓度；实现未知样品中AFB1的检测。

2.根据权利要求1所述的一种用于检测AFB1的水凝胶限域光激发比率电化学传感方法，其特征在于，步骤（1）中，所述聚乙二醇、聚乙二醇二丙烯酸酯、2‑羟基‑2‑甲基苯丙酮、丙烯酸酯聚乙二醇羧基和超纯水的用量关系为2 mL：2 mL：0.5 mL：0.5 mL：1mL；其中聚乙二醇的分子量为200，纯度大于90%；聚乙二醇二丙烯酸酯的分子量为700，纯度大于90%；2‑羟基‑2‑甲基苯丙酮的分子量为200，纯度为97%；丙烯酸酯聚乙二醇羧基的浓度为20 mM，纯度大于90%。

3.根据权利要求1所述的一种用于检测AFB1的水凝胶限域光激发比率电化学传感方法，其特征在于，步骤（2）中，HAuCl4溶液的浓度为0.4 mM，Na3C6H5O7·2H2O的浓度为100 mg ‑1mL ，HAuCl4溶液和Na3C6H5O7·2H2O的用量关系为25.2 mL：0.25 mL。

4.根据权利要求1所述的一种用于检测AFB1的水凝胶限域光激发比率电化学传感方法，其特征在于，步骤（2）中，水凝胶基质与AuNPs溶液的体积比为3：1；其中AuNPs溶液的浓度为5.45 nM。

5.根据权利要求1所述的一种用于检测AFB1的水凝胶限域光激发比率电化学传感方法，其特征在于，步骤（3）中，双链DNA的浓度为4 µM；MB溶液的浓度为400 µM；基于水凝胶的传感基质中水凝胶、MB溶液、双链DNA的体积比为4：1：2。

6.根据权利要求1所述的一种用于检测AFB1的水凝胶限域光激发比率电化学传感方‑1法，其特征在于，步骤（4）中，所述AFB1的标准溶液浓度为0.001 1000 ng mL ；所述孵育时~间为1.0 1.4 h。

~

7.根据权利要求1所述的一种用于检测AFB1的水凝胶限域光激发比率电化学传感方法，其特征在于，步骤（4）中，混合液修饰的用量为10‑15 µL；所述AFB1标准溶液与基于水凝胶的传感基质的体积比为1：7；所述紫外光聚合的操作为：在波长为365 nm的紫外光聚合时间为25 s。

8.根据权利要求1所述的一种用于检测AFB1的水凝胶限域光激发比率电化学传感方法，其特征在于，步骤（5）中所述电解质溶液中K3[Fe(CN)6]的浓度为0.01mM；PBS缓冲溶液为

0.1 M、pH=7.4。

9.根据权利要求1所述的一种用于检测AFB1的水凝胶限域光激发比率电化学传感方法，其特征在于，步骤（6）中所述电化学测试由型号为CHI1040C的电化学工作站记录、检测；

扫描电压范围为‑0.4 0.4 V，振幅为0.025 V，频率为25 Hz。

~

10.根据权利要求1所述的一种用于检测AFB1的水凝胶限域光激发比率电化学传感方2

法，其特征在于，所述外界光源激发的条件为：功率为 500 mW/cm ，距离工作电极的垂直距离为3 5 cm。

~