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专利号: 2022117168038
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-09-11
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种利用微生物酶解辅助提取艾叶多糖的方法,其特征在于,所述方法为:(1)微生物菌株禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)AY2‑19孢子接种于产酶培养基中,于30℃、

180–200r/min振荡培养64–72h,发酵液过滤,滤液即为粗酶液;所述产酶培养基终浓度组成为:小麦麸皮40–50g/L,蛋白胨8–10g/L,NaNO3 5–6g/L,KH2PO4 1–2g/L,MgSO4·7H2O 0.25–

0.5g/L,CaCl2 0.4–0.5g/L,溶剂为自来水,pH 6.0–6.5;所述的禾谷镰刀菌AY2‑19,保藏于广东省微生物菌种保藏中心,保藏编号GDMCC No:63062,保藏日期2022年12月20日,地址:广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼;邮编510070;(2)将粗酶液与艾叶粉混合,于

26–30℃条件下酶解4–6h,得艾叶酶解物;(3)艾叶酶解物中补充去离子水,经85–90℃下超声提取,滤液浓缩后,获得艾叶水提浓缩液;(4)向艾叶水提浓缩液加乙醇使多糖沉淀,沉淀物经乙醇洗涤和干燥后,获得艾叶多糖提取物。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的产酶培养基组成为:小麦麸皮50g/L,蛋白胨10g/L,NaNO3 5g/L,KH2PO4 2g/L,MgSO4·7H2O 0.25g/L,CaCl2 0.5g/L,溶剂为自来水,pH 6.0。

3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述禾谷镰刀菌AY2‑19在产酶培养前,需要先经平板培养基培养产生孢子,然后将孢子悬浮于生理盐水中,获得禾谷镰刀菌AY2‑19孢子液,按体积分数3%–5%的量接入产酶培养基进行培养;所述禾谷镰刀菌AY2‑19孢子培养方法为:将禾谷镰刀菌AY2‑19接种于马铃薯葡萄糖琼脂平板培养基,于28℃培养64–72h,获得平板培养物;平板培养物中加入无菌生理盐水,用接种环搅动使孢子悬浮,获得禾谷镰刀菌AY2‑19孢子液。

4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(2)中艾叶粉是新鲜艾叶经自来水洗净后85℃烘干,粉碎后过40目筛的细粉。

5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(2)中粗酶液体积用量以艾叶粉质量计为4–10mL/g。

6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(3)中超声提取的条件是:往艾叶酶解物中补充去离子水,搅拌均匀后于水温85–90℃的超声波清洗机中,150W超声提取60–

90min。

7.如权利要求6所述的方法,其特征在于,所述步骤(3)中艾叶酶解物经超声提取的滤液浓缩的条件为:滤液于60℃、–0.1MPa条件下减压浓缩至原体积的1/25–1/20,获得艾叶水提浓缩液。

8.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(4)艾叶多糖提取物的制备方法为:

向艾叶水提浓缩液中加入无水乙醇,使溶液的乙醇体积分数达到75%–80%,4℃条件下静置12–16h后,8000r/min离心5–10min,弃去上清液,加入原料艾叶粉质量计0.6–2mL/g的无水乙醇洗涤一次,再次离心,沉淀物于50℃、–0.1Mpa真空干燥至恒重,得艾叶多糖提取物。