1.一种细胞色素P450突变酶，其特征在于，所述细胞色素P450突变酶的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

2.一种包含权利要求1所述细胞色素P450突变酶的重组菌。

3.根据权利要求2所述的重组菌，其特征在于，通过如下方法制备获得：

将CYP154C2‑RhFRED基因导入pET28a质粒获得pET28a‑CYP154C2‑RhFRED，利用定点突变技术分别突变M191F和V285L获得pET28a‑CYP154C2(M191F/V285L)‑RhFRED；将pET28a‑CYP154C2(M191F/V285L)‑RhFRED质粒转入到大肠杆菌BL21(DE3)，获得重组菌；其中，所述pET28a质粒的基因序列如SEQ ID NO.1所示，pET28a‑CYP154C2(M191F/V285L)‑RhFRED基因序列如SEQ ID NO.2所示，CYP154C2(M191F/V285L)基因序列如SEQ ID NO.3所示，RhFRED基因序列如SEQ ID NO.4所示。

4.一种权利要求2‑3任一项所述重组菌在合成2α‑羟基化甾体类化合物中的应用，其特征在于，重组菌在合成2α‑羟基化甾体类化合物中采用的底物为睾酮，经生物转化，得到的

2‑羟基化甾体类化合物为2α‑羟基睾酮；或者重组菌在合成2α‑羟基化甾体类化合物中采用的底物为雄烯二酮，经生物转化，得到的2‑羟基化甾体类化合物为2α‑羟基雄烯二酮。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述应用具体为：

扩大培养重组菌至菌液OD600值达到0.8及以上，加入IPTG和5‑氨基乙酰丙酸盐诱导菌体表达蛋白，同时将温度降低至22℃，继续培养，离心收集菌体；

将收集的菌体悬浮在50mM磷酸盐缓冲液中，保持pH为7.4，加入甾体类底物进行生物转化，在25℃振荡反应，对发酵液进行提取、分离，得到2‑羟基化甾体类化合物。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，扩大培养重组菌的方法具体为：

将重组菌加入LB培养基中，在37℃条件下培养16h，得重组大肠杆菌的种子液；将所述种子液接种到TB培养基中，所述种子液和TB培养基的体积比为1:100，在37℃，摇床转速

220r/min的条件下进行扩大培养，直至菌液OD600值达到0.8及以上。

7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述IPTG在TB培养基中的终浓度为0.1mM，所述5‑氨基乙酰丙酸盐在TB培养基中的浓度为0.5mM。

8.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述磷酸缓冲液由终浓度为50mM、pH＝7.4的磷酸盐和甘油组成，甘油体积为所述磷酸缓冲液的10％。