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专利号: 2022109685827
申请人: 齐鲁工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种具有抗氧化、抗衰老活性的多管藻藻红蛋白活性肽的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)多管藻藻红蛋白的提取:对多管藻进行藻红蛋白提取,得到多管藻藻红蛋白溶液;

(2)酶解:使用酶法对步骤(1)所得的多管藻藻红蛋白溶液进行水解得到多管藻藻红蛋白肽溶液;所述酶解具体包括以下步骤:调节多管藻藻红蛋白溶液的pH值为10.5,然后加入碱性蛋白酶,混匀后置于摇床中振荡酶解;

酶解结束,酶解液沸水浴,灭活残留的酶;

离心,收集上清液,弃沉淀,上清液即为多管藻藻红蛋白肽溶液;

(3)超滤:对步骤(2)所得的多管藻藻红蛋白肽溶液进行超滤处理,得到超滤组分;所述超滤的具体步骤为:使用截留分子量为3 kDa的超滤离心管,离心,吸取超滤管中截留的溶液,即为分子量<3 kDa的超滤组分;

(4)筛选:对步骤(3)所得的超滤组分进行筛选,即得到所述的多管藻藻红蛋白活性肽;

所述活性肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述SEQ ID NO.1的氨基酸序列为:Arg‑Ala‑Arg‑Pro‑Arg‑Phe(RARPRF)。

2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)所述多管藻藻红蛋白的提取具体包括以下步骤:将多管藻分散到蒸馏水中,浸泡、冷冻、融化,反复多次,然后离心,取上清液,得到蛋白粗提液;

在蛋白粗提液中加入硫酸铵,静置,离心,取沉淀,将沉淀重溶后进行透析,取上清液,得到多管藻藻红蛋白粗提液;

将多管藻藻红蛋白粗提液用阴离子交换层析法进行纯化,得到纯化的多管藻藻红蛋白溶液。

3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(4)所述筛选的具体步骤为:通过超高效液相色谱‑串联质谱法得到超滤组分中置信度较高的肽段序列;

对得到的肽段序列进行虚拟筛选,根据生物信息学预测打分,筛选无毒性、生物学活性高、具有抗氧化、抗衰老活性的多肽,即为所述的多管藻藻红蛋白活性肽。

4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,对所述多管藻藻红蛋白活性肽进行活性测定,包括:体外活性测定:利用DPPH自由基清除率实验、ABTS自由基清除率实验鉴定多管藻藻红蛋白活性肽的体外抗氧化活性;

体内活性测定:在秀丽隐杆线虫上测定多管藻藻红蛋白活性肽的体内抗氧化、抗衰老活性。

5.根据权利要求1所述的制备方法得到的多管藻藻红蛋白活性肽在制备具有抗氧化、抗衰老作用的产品中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述产品包括化妆品、药物。