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专利号: 2022109684595
申请人: 安徽农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种茶树离体再生的方法,其包括如下步骤:

(1)外植体材料的制备:取带有茎节点的茎段作为外植体;

(2)定芽诱导:将步骤(1)切好的茎段接种在定芽诱导培养基中,所述定芽诱导培养基基本培养基以MS培养基为基本培养基,添加1‑4 mg/L 6‑BA;

(3)不定芽诱导与增殖:将步骤(2)中带定芽的茎段接种在不定芽诱导培养基中,所述不定芽诱导培养基的基本培养基为MS培养基,添加1‑3 mg/L 6‑BA、0.1‑0.3 mg/L NAA、

0.05‑0.15mg/L KT和0.5‑1.5mg/L脯氨酸;

(4)不定芽伸长:将步骤(3)中诱导出的不定芽接种在不定芽伸长培养基中,所述不定芽伸长培养基的基本培养基为MS培养基,添加0.2‑1mg/L 6‑BA和0.02‑0.1mg/L NAA;

(5)不定根诱导:选取步骤(4)中生长健壮的伸长芽苗,单株接种到生根培养基中,基本培养基为1/2MS培养基,添加1‑4 mg/L IBA。

2.如权利要求1所述茶树离体再生的方法,其特征在于,进一步包括如下步骤:(6)炼苗:选取步骤(5)中长出发达根系的茶树苗,去掉封口膜,往培养瓶中加入少量的蒸馏水,置于室温下炼苗2‑4 d后。

3.如权利要求2所述茶树离体再生的方法,其特征在于,进一步包括如下步骤:(7)移栽:取出步骤(6)炼苗后的茶树苗洗干净根部的培养基,移栽至含有混合土塑料盆中,置于温室中生长。

4.如权利要求1至3任一项所述茶树离体再生的方法,其特征在于,步骤(2)至(5)中的基本培养基添加蔗糖25‑35 g/L,琼脂粉5‑9 g/L,调节培养基pH值为5.8±0.1。

5.如权利要求1至3任一项所述茶树离体再生的方法,其特征在于,步骤(2)至(5)的培养条件为光照强度1500‑2500 lx,每天光照14‑18 h,培养温度24±2℃。

6.如权利要求5所述茶树离体再生的方法,其特征在于,步骤(1)中,具体操作是切取带部分叶片的当年所生半木质化茎段,茎段长0.5‑2cm,叶片切除远端,保留靠叶柄部位的叶片,以叶柄着生部位为茎段节点,上下端平切,切成带有一个茎节点的茎段外植体。

7.如权利要求5所述茶树离体再生的方法,其特征在于,步骤(2)中,培养时长3‑5周,培养基中添加2‑3 mg/L6‑BA。

8.如权利要求5所述茶树离体再生的方法,其特征在于,步骤(3)中,培养时长3‑5周,培养基中添加2 mg/L 6‑BA 、0.2mg/L NAA、0.1 mg/L KT和1 mg/L 脯氨酸。

9.如权利要求5所述茶树离体再生的方法,其特征在于,步骤(4)中,培养时长3‑5周,培养基中添加0.8 mg/L6‑BA、0.08 mg/LNAA。

10.如权利要求3所述茶树离体再生的方法,其特征在于,步骤(7)中,所述混合土中营养土和珍珠岩体积比例为3:1。