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专利号: 2022107333293
申请人: 宁波大学
专利类型:发明专利
专利状态:授权未缴费
更新日期:2025-07-12
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种环脂肽类化合物,其特征在于该环脂肽类化合物的结构式如(I)所示;

(I)。

2.一种权利要求1所述的环脂肽类化合物的制备方法,其特征在于包括如下步骤:(1)发酵生产

将保藏号为CGMCC No.6554的解淀粉芽孢杆菌在含高氏一号的培养皿上进行活化,于

28 ℃恒温培养7天后,接种到A液体培养基中,旋转摇床28℃,150 rpm/min的转速下培养3天,得到种子液,将种子液按体积比10 %的接种量接种到预先灭菌好的YSP培养基中,放置于摇床上28℃、150rpm培养7天,最终获得发酵物;

(2)浸膏提取

在步骤(1)得到的发酵物中加入与发酵物等体积的乙酸乙酯,反复萃取3次后,将乙酸乙酯浸提液经减压蒸发后,加入与发酵物等体积的由乙酸乙酯和水等体积混合的混合液重复萃取3次,合并三次萃取所得乙酸乙酯萃取液在减压浓缩蒸发后,获得粗浸膏;

(3)化合物的分离制备

将步骤(2)得到的粗浸膏用甲醇溶剂溶解后,经过减压柱色谱VLC进行初步的分离,以体积比20:1,5:1,1:1,1:2,0:1的石油醚/乙酸乙酯进行梯度洗脱,按极性从大到小排列按序合并相似组分,得到了5个组分;将收集的第3个组分进行正相中压色谱层析,以体积比1:

0,4:1,3:2,1:1,3:7,1:4,0:1的石油醚/乙酸乙酯进行梯度洗脱,按极性从大到小排列按序合并相似组分,得到了4个组分;将收集的第3个组分进行反相中压柱层析分离,采用的洗脱剂为甲醇和水,甲醇体积百分数为30%‑100%,洗脱时间120 min,共收集50管;取第28管进行半制备反相高效液相色谱分离,采用乙腈与水按体积比65:35的比例混合而成的混合液为洗脱剂,分离纯化得到环脂肽类化合物,其结构如(I)所示: (I)。

3.根据权利要求2所述的一种环脂肽类化合物的制备方法,其特征在于步骤(1)中所述的A液体培养基的配制方法如下:将淀粉20 g,蛋白胨2g,酵母粗提物6g,CaCO3 1 g,KBr 

100 mg,Fe2(SO4)3•4H20 40mg溶于1L 海水中配制而成。

4.根据权利要求2所述的一种环脂肽类化合物的制备方法,其特征在于所述的YSP培养基的配制方法如下:将10 g蛋白胨,5 g酵母浸粉,20 g蔗糖和35 g海盐溶于1000 ml蒸馏水中配制而成。

5.根据权利要求2所述的一种环脂肽类化合物的制备方法,其特征在于步骤(3)中所述的反相中压柱层析中梯度洗脱剂为甲醇和水,甲醇体积百分数从30‑60%,洗脱时间0‑45 min;甲醇体积百分数从83%‑100%,洗脱时间为46‑120 min。

6.根据权利要求2所述的一种环脂肽类化合物的制备方法,其特征在于:步骤(3)中所述的半制备反相高效液相色谱的化合物分离制备的流速为 2.0 mL/min。

7.一种权利要求1‑6中任一项所述的环脂肽类化合物在制备抑制耐甲氧西林金葡菌药物、抑制金黄色葡萄球菌药物、抑制溶藻弧菌药物和抑制溶血弧菌药物中至少一种的用途。