1.一种如式III所示化合物或其药学上可接受的盐的制备方法,其特征在于,其包含如下步骤:(1)硅藻土层析分离,其包含如下步骤:青霉菌发酵液总浸膏经硅藻土层析分离,以乙酸乙酯洗脱液洗脱,得乙酸乙酯浸膏;
(2)硅胶柱层析分离,其包含如下步骤:乙酸乙酯浸膏经硅胶柱层析分离,以石油醚和乙酸乙酯的混合洗脱液进行梯度洗脱,石油醚与乙酸乙酯的体积比依次为20:1,10:1,8:1,
7:1,5:1,3:1,2:1,1:1,0:1,收集第3个组分得Fr.C;
(3)凝胶柱层析分离,其包含如下步骤:Fr.C经凝胶柱层析,以醇类溶剂为洗脱液洗脱,收集第2个组分得到所述待分离样品;
所述青霉菌为Penicillium soppii;
将如式III所示化合物的待分离样品进行高效液相色谱法分离制备,收集组分得如式III所示化合物;
色谱条件包括:
色谱柱为C18OBD柱;
流动相A为腈类溶剂;
流动相B为水;
当所述如式III所示化合物为化合物1 时,所述高效液相色谱法分离制备的洗脱梯度为:15‑30min内流动相B由75v%下降至40v%,流动相A由25v%上升至60v%;
所述的如式III所示化合物为化合物11 时,所述高效液相色谱法分离制备的洗脱梯度为:30‑45min内流动相B由80v%下降至0v%,流动相A由20v%上升至100v%。
2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法满足如下一个或多个条件:(1)所述高效液相色谱法分离制备中,所述腈类溶剂为乙腈;
(2)所述高效液相色谱法分离制备中,所述待分离样品中所述如式III所示化合物含量为25%至70%;
(3)所述高效液相色谱法分离制备中,所述色谱柱温度为室温;
(4)所述高效液相色谱法分离制备中,所述高效液相色谱为Waters,Sunfire C18 OBD;
(5)所述色谱柱的长度为100~350mm;
(6)所述色谱柱的内径为9.4~30mm;
(7)所述色谱柱的填料颗粒度为5~10μm;
和(8)所述高效液相色谱法分离制备中,流动相的流速为1~25mL/min。
3.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法满足如下一个或多个条件:(1)所述高效液相色谱法分离制备中,所述待分离样品中所述如式III所示化合物含量为25%至40%;
(2)所述高效液相色谱法分离制备中,所述室温为10~40℃;
(3)所述色谱柱的长度为250mm;
(4)所述色谱柱的内径为10mm或19mm;
(5)所述色谱柱的填料颗粒度为5μm;
和(6)所述高效液相色谱法分离制备中,流动相的流速为7.5mL/min或24mL/min。
4.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法满足如下一个或多个条件:(1)当所述如式III所示化合物为化合物1 时,所述高效液相色谱法分离制备的洗脱梯度为:第20min流动相B由75v%下降至40v%,流动相A由25v%上升至60v%;
(2)当所述的如式III所示化合物为化合物1 时,所述色谱柱的长度为
100~350mm;
(3)当所述的如式III所示化合物为化合物1 时,所述色谱柱的内径为
9.4~30mm;
(4)当所述的如式III所示化合物为化合物1 时,所述色谱柱的填料颗粒度为5~10μm;
(5)当所述的如式III所示化合物为化合物1 时,所述高效液相色谱法分离制备的保留时间为9.55min;
(6)当所述的如式III所示化合物为化合物11 时,所述高效液相色谱法分离制备的洗脱梯度为:第35min流动相B由80v%下降至0v%,流动相A由20v%上升至
100v%;
(7)当所述的如式III所示化合物为化合物11 时,所述色谱柱的长度为
100~350mm;
(8)当所述的如式III所示化合物为化合物11 时,所述色谱柱的内径为
9.4~30mm;
(9)当所述的如式III所示化合物为化合物11 时,所述色谱柱的填料颗粒度为5~10μm;
(10)当所述的如式III所示化合物为化合物11 时,所述高效液相色谱法分离制备的保留时间为10.55min;
(11)所述高效液相色谱法分离制备中,所述待分离样品中化合物1的含量为0%至
10%;
和(12)所述高效液相色谱法分离制备中,所述待分离样品中化合物11含量为25%至
60%。
5.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法满足如下一个或多个条件:(1)当所述的如式III所示化合物为化合物1 时,所述色谱柱的长度为
250mm;
(2)当所述的如式III所示化合物为化合物1 时,所述色谱柱的内径为
10mm;
(3)当所述的如式III所示化合物为化合物1 时,所述色谱柱的填料颗粒度为5μm;
(4)当所述的如式III所示化合物为化合物11 时,所述色谱柱的长度为
250mm;
(5)当所述的如式III所示化合物为化合物11 时,所述色谱柱的内径为
19mm;
(6)当所述的如式III所示化合物为化合物11 时,所述色谱柱的填料颗粒度为5μm;
(7)所述高效液相色谱法分离制备中,所述待分离样品中化合物1的含量为2.0%至
2.7%;
和(8)所述高效液相色谱法分离制备中,所述待分离样品中化合物11含量为25%至
35%。
6.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,当所述的如式III所示化合物为化合物1时,所述色谱柱的规格为:长度250mm,内径10mm,填料粒径5μm;
或,当所述的如式III所示化合物为化合物11 时,所述色谱柱的规格为:长度250mm,内径19mm,填料粒径5μm。
7.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法满足如下一个或多个条件:(1)所述步骤(1)中,所述青霉菌发酵液总浸膏由如下步骤制备得到:将青霉菌的发酵液用乙醇提取,液缩得到青霉菌发酵液总浸膏;
(2)所述步骤(1)中,在进行所述硅藻土层析分离前,所述青霉菌发酵液总浸膏经过石油醚萃取,除去小极性杂质;
(3)所述步骤(1)中,所述硅藻土层析分离包含如下步骤:将所述青霉菌发酵液总浸膏与硅藻土按质量比1:1混合装柱,以所述洗脱液进行洗脱,浓缩洗脱液,可得乙酸乙酯浸膏;
(4)所述步骤(1)中,所述硅藻土层析分离中,所述洗脱液与所述青霉菌发酵液总浸膏的体积比为4:1;
(5)所述步骤(2)中,石油醚与乙酸乙酯的体积比为20:1至10:1时,混合洗脱液用量为2倍柱体积至4倍柱体积;
(6)所述步骤(2)中,石油醚与乙酸乙酯的体积比为8:1至1:1时,混合洗脱液用量为3倍柱体积至5倍柱体积;
(7)所述步骤(2)中,石油醚与乙酸乙酯的体积比为0:1时,混合洗脱液用量为2倍柱体积至4倍柱体积;
(8)所述步骤(2)中,所述硅胶柱层析分离包含如下步骤:将所述乙酸乙酯浸膏与硅胶混合装柱,以所述混合洗脱液进行梯度洗脱,收集组分即可;
(9)所述步骤(2)中,所述硅胶柱层析分离所用硅胶柱规格:直径15cm,长1.5m;
(10)所述步骤(2)中,所述硅胶柱层析分离中,采用硅胶的粒径为200‑300目;
(11)所述步骤(3)中,所述凝胶柱层析分离过程中,所用凝胶柱的填料为羟丙基葡聚糖凝胶LH‑20;
(12)所述步骤(3)中,所述醇类溶剂为甲醇;
(13)所述步骤(3)中,所述洗脱液与所述Fr.C的体积比为5:1;
(14)所述步骤(1)中,所述青霉菌的发酵液经由如下方法制备得到,其包含如下步骤:将青霉菌接种于大米发酵培养基中进行发酵培养,可得青霉菌的发酵液;
(15)所述式III所示化合物为化合物1时,所述化合物1为将所述青霉菌发酵液依次经过所述步骤(1)、所述步骤(2)、所述步骤(3)和所述高效液相色谱法分离制备得到;
和(16)所述式III所示化合物为化合物11时,所述化合物11为将所述青霉菌发酵液依次经过所述步骤(1)、所述步骤(2)、所述步骤(3)和所述高效液相色谱法分离制备得到。
8.如权利要求7所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法满足如下一个或多个条件:(1)所述步骤(2)中,石油醚与乙酸乙酯的体积比为20:1至10:1时,混合洗脱液用量为3倍柱体积;
(2)所述步骤(2)中,石油醚与乙酸乙酯的体积比为8:1至1:1时,混合洗脱液用量为4倍柱体积;
(3)所述步骤(2)中,石油醚与乙酸乙酯的体积比为0:1时,混合洗脱液用量为3倍柱体积;
(4)所述发酵培养中,所述大米发酵培养基由大米与水混合物灭菌制得;
(5)所述发酵培养中,所述发酵培养的温度为20℃至40℃;
(6)所述发酵培养中,所述发酵培养的时间为7至15天;
和(7)所述青霉菌的发酵液经由如下步骤制备得到:将大米和水灭菌制得大米发酵培养基,将青霉菌接种于上述大米发酵培养基中,于28℃进行10天发酵培养,可得所述青霉菌的发酵液。
9.如权利要求7所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法满足如下一个或多个条件:(1)所述发酵培养中,所述发酵培养的温度为28℃;
和(2)所述发酵培养中,所述发酵培养的时间为10天。
10.一种物质A在制备药物中的应用,其特征在于,所述药物用于预防和/或治疗LPS诱发神经损伤相关的疾病;所述物质A为如式III所示化合物或其药学上可接受的盐;
11.如权利要求10所述的应用,其特征在于,所述应用满足如下一个或多个条件:(1)所述如式III所示化合物为化合物1 和/或化合物11和(2)所述应用中,所述LPS诱发神经损伤相关的疾病为阿尔茨海默病、帕金森病或脑缺血。
12.如权利要求10所述的应用,其特征在于,所述如式III所示化合物为化合物1 的晶体,其具有如下晶胞参数:空间群P212121; α=90°, β=94.6530(10)°,γ=90°, 晶胞内不对称单位数Z=60,晶体3
密度为1.399mg/m。