1.一种舌癌类器官的培养基，其特征在于：所述培养基包括如下成分：Advanced DMEM/F12、B27、GluMax、HEPES、EGF、Nicotinamide、N‑Acetylcysteine、Y27632、A8301、Noggin、Heregulin 1和R‑Spondin‑1；各组分的含量为：Advanced DMEM/F12 1×，B27 50×稀释为1×，GluMax 100×稀释为1×，HEPES 1×，EGF 50ng/ml，Nicotinamide 10mM，N‑Acetylcysteine 1mM，Y27632 10μM，A8301 5μM，Noggin 100ng/ml，Heregulin 1 100ng/ml，R‑Spondin‑1 100ng/ml。

2.一种舌癌类器官的培养方法，其特征在于：包括如下步骤：

(1)将新鲜舌癌肿瘤组织分别用含有青链霉素和氟康唑的PBS冲洗干净，取上皮组织剪

3

切为0.5‑2mm的碎块，将剪切好的组织碎块移入含有酶解液的离心管并封口，最后将离心管置于摇床中消化至酶解液浑浊、组织碎块基本消失为止；

(2)消化完成后将含组织细胞的酶解液4℃、1500转/分离心5min，弃上清，收集组织细胞沉淀，加入PBS清洗干净后，在4℃、1500转/分离心5‑10min，弃上清液，向细胞沉淀中加入舌癌类器官培养基，充分重悬后转移至培养皿中放在37℃细胞培养箱中悬浮培养24小时；

(3)悬浮培养24小时后用100μm细胞筛过滤，4℃、1500转/分离心5min，弃上清，用Matrigel基质胶重悬细胞沉淀，呈胶滴状接种在孔板中；然后将孔板置于37℃细胞培养箱中5‑10min，待胶滴完全凝固后再加入舌癌类器官培养基继续培养；

(4)根据前期已建立的舌癌类器官培养体系完成培养，定期更换培养基，当细胞密度达到70‑90％时，或单一类器官球体过大细胞有崩解前兆时，用TryplE消化传代，稳定传代后部分冷冻保存。

3.根据权利要求2所述一种舌癌类器官的培养方法，其特征在于：所述酶解液包括以下成分：胶原酶I、透明质酸酶IV、DNaseI和DispaseⅡ。

4.根据要求3所述一种舌癌类器官的培养方法，其特征在于：所述酶解液各组分的含量：胶原酶I 2mg/ml，透明质酸酶IV 0.1mg/ml，DNaseI 0.05mg/ml，DispaseⅡ 1.5mg/ml。

5.根据权利要求2所述一种舌癌类器官的培养方法，其特征在于：所述舌癌类器官培养基的组成成分如下：Advanced DMEM/F12 1×，B27 50×稀释为1×，GluMax 100×稀释为1×，HEPES 1×，A8301 5μM，Y27632 10μM，Nicotinamide 10mM，N‑Acetylcysteine 1mM。

6.根据权利要求2所述一种舌癌类器官的培养方法，其特征在于：所述舌癌类器官培养基包括如下成分：Advanced DMEM/F12 1×，B27 50×稀释为1×，GluMax 100×稀释为1×，HEPES 1×，EGF 50ng/ml，Nicotinamide 10mM，N‑Acetylcysteine 1mM，Y27632 10μM，A8301 5μM。

7.根据权利要求2所述一种舌癌类器官的培养方法，其特征在于：所述舌癌类器官培养基由如下成分组成：Advanced DMEM/F12 1×，B27 50×稀释为1×，GluMax 100×稀释为1×，HEPES 1×，EGF 50ng/ml，Nicotinamide 10mM，N‑Acetylcysteine 1mM，Y27632 10μM，A8301 5μM，Noggin 100ng/ml，Heregulin 1 100ng/ml，R‑Spondin‑1 100ng/ml。

8.根据权利要求2所述一种舌癌类器官的培养方法，其特征在于：步骤(1)所述PBS中青链霉素和氟康唑的百分含量分别是1％和0.2％。

9.根据权利要求2所述一种舌癌类器官的培养方法，其特征在于：步骤(2)所述PBS含有Y‑27632和BSA，其中Y‑27632和BSA用量分别为10μM和0.1％。