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专利号: 2020109072373
申请人: 南通大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-08-12
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种培养专用于生物医药功能研究的人肺癌类器官3D模型的方法,其特征在于,包括以下步骤:

1)获取新鲜离体的肺癌肿瘤组织,冰上剪碎并用冷PBS缓冲液冲洗,用胶原酶消化肿瘤组织1小时并继而用胰酶37℃消化肿瘤组织10分钟,形成单细胞悬液;所述新鲜离体的肺癌肿瘤组织为肺癌患者手术切除的新鲜肿瘤样本;

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2)细胞计数并将单细胞悬液与基质胶重悬,按50 μL每孔1x10接种于细胞培养板,随后将细胞培养板转移至培养箱,37℃ 10‑20分钟,凝固基质胶;

3)加入肺癌类器官条件培养基并完全没过基质胶,培养至得到人肺癌类器官3D模型;

所述肺癌类器官条件培养基由DMEM/F‑12基础培养基和添加因子组成,所述添加因子为:2 mM Glutamax、10 mM HEPES、100U/mL  Antibiotic‑Antimycotic、1XB‑27 Supplement、1.25mM N‑Acetyl‑L‑cysteine、50 ng/mL EGF、100 ng/mL FGF‑10、100 ng/mL FGF‑4、100 ng/mL Noggin、0.5 μM A 83‑01和10 μM Y‑27632;所述肺癌为肺鳞癌。

2.根据权利要求1所述的培养专用于生物医药功能研究的人肺癌类器官3D模型的方法,其特征在于,步骤3)中,肺癌类器官条件培养基的培养条件为于37℃,5% CO2条件下维持培养。

3.根据权利要求1所述的培养专用于生物医药功能研究的人肺癌类器官3D模型的方法,其特征在于,所述生物医药功能研究包括肺癌靶向药物的体外高通量筛选、抗肺癌药物敏感性评价。

4.权利要求1至3中任一所述培养专用于生物医药功能研究的人肺癌类器官3D模型的方法获得的人肺癌类器官3D模型。

5.权利要求4所述的人肺癌类器官3D模型在肺癌靶向药物的体外高通量筛选中的应用。

6.权利要求4所述的人肺癌类器官3D模型在抗肺癌药物敏感性评价中的应用。