1.一种吲哚二酮哌嗪生物碱的制备方法,其特征在于,所述方法按如下步骤进行:(1)将花斑曲霉(Aspergillus versicolor)ZJUTE2接种至大米固体培养基,在20‑30℃条件下暗培养15‑30天,获得大米发酵产物;所述花斑曲霉ZJUTE2,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏日期为2022年1月13日,保藏编号为CCTCC NO:M2022064,地址为中国,武汉,武汉大学;所述大米固体培养基为大米和蒸馏水的混合物,其中蒸馏水用量以大米质量计为1‑
5mL/g;(2)将大米发酵产物中加入有机溶剂,室温浸提,提取液浓缩至无液体流出,获得粗提物浸膏;(3)将步骤(2)粗提物浸膏用水悬浮,以有机溶剂萃取,收集有机相,减压浓缩至干,得到萃取物浸膏;(4)将步骤(3)萃取物浸膏用甲醇溶解后进行MCI CHP20P柱层析,以体积浓度30‑100%甲醇‑水为洗脱液,收集体积浓度70‑80%的甲醇‑水洗脱部位,减压浓缩至干,得浓缩物;(5)将步骤(4)所得浓缩物用甲醇溶解,于室温重结晶,过滤,得晶体,即得到式(Ⅰ)所示吲哚二酮哌嗪生物碱;
2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)所述花斑曲霉ZJUTE2接种至大米固体培养基前,先进行活化培养,再将活化后的菌悬液以体积浓度0.1‑1%的接种量接种大米固体培养基,所述活化是指将花斑曲霉ZJUTE2接种至PDA培养基,28℃培养,使菌株活化,将活化后的菌株用含体积浓度2%吐温80的无菌水重悬,得到菌悬液。
3.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中发酵培养条件为:28℃条件下暗培养20天。
4.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中所述有机溶剂为95%乙醇、甲醇或丙酮;所述有机溶剂体积用量以大米固体培养基中大米干重计为2~8mL/g。
5.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)所述浸提至少进行3次,每次提取时间为3~5天。
6.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(3)中所述水体积用量以粗提物浸膏重量计为2‑5mL/g;所述有机溶剂为乙酸乙酯,所述有机溶剂与水的体积比为1:0.5‑3;萃取3‑5次。
7.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(4)方法为:萃取物浸膏以甲醇溶解后进行MCI CHP20P柱层析,依次以体积比为30:70、40:60、50:50、60:40、70:30、80:20、90:
10和100:0的甲醇/水混合溶剂为洗脱剂进行梯度洗脱,每一梯度洗脱2~5个柱体积,流速
10‑20mL/min;收集体积比70:30‑80:20的甲醇‑水洗脱部位,减压浓缩至干,得浓缩物。
8.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(5)甲醇体积用量以浓缩物质量计为20‑30mL/g。