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专利号: 2022104644182
申请人: 南京师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-08-18
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种提高产油微生物的油脂产量的方法,其特征在于,该方法包括:将产油微生物与纳米量子点进行偶联形成量子点复合菌体,将所述量子点复合菌体接种至培养基中在光照条件下进行培养;

其中,所述纳米量子点为磷化铟纳米粒子,所述光照的波长为400nm‑480nm,所述产油微生物为裂殖壶菌;

所述磷化铟纳米粒子为多酚官能化的磷化铟纳米粒子,所述多酚官能化的磷化铟纳米粒子的制备方法包括以下步骤:(1)将磷化铟粉末经研磨后与水混合,再进行超声处理、固液分离得到磷化铟纳米颗粒;所述研磨的时间为30min以上,所述磷化铟粉末与水的重量比为1:400‑2000,所述固液分离的过程包括:将超声处理后的混合液进行离心得到附着在管壁上的微颗粒,将所述微颗粒用水进行至少一次重悬、离心,得到平均粒径小于300nm的所述磷化铟纳米颗粒,每次所述离心的条件包括:转速为6000‑10000rpm,时间为3‑8min;

(2)在反应溶剂存在的条件下,将所述磷化铟纳米颗粒与铁盐、单宁酸混合进行反应I得到反应颗粒,将所述反应颗粒洗涤后与低级有机醇混合进行孵育;所述反应溶剂为水,所述铁盐选自氯化铁、硫酸铁和硝酸铁中的至少一种,所述磷化铟纳米颗粒、单宁酸和铁盐的摩尔量比为2‑4.5:1‑2:1,所述反应I的条件包括:温度为20‑30℃,pH为6‑7,时间为10‑

20min,所述低级有机醇选自甲醇、乙醇、正丙醇和异丙醇中的至少一种,所述孵育的时间为

8‑12min;

所述偶联的过程包括:将所述产油微生物与聚烯丙基胺盐酸盐混合进行反应II得到产油微生物修饰细胞,将所述产油微生物修饰细胞与所述纳米量子点混合进行反应III;所述产油微生物与聚烯丙基胺盐酸盐混合的过程包括:将含有所述产油微生物的悬浮液与含有所述聚烯丙基胺盐酸盐的溶液以体积比5‑15:1进行混合,所述产油微生物的悬浮液的OD600为10‑15,所述聚烯丙基胺盐酸盐的溶液浓度为40‑60mg/L;所述反应II的条件包括:温度为

20‑40℃,时间为20‑40s;所述产油微生物修饰细胞与所述纳米量子点混合的过程包括:将含有所述产油微生物修饰细胞的悬浮液与含有所述纳米量子点的悬浮液以体积比40‑150:

1进行混合,所述产油微生物修饰细胞的悬浮液的OD600为10‑15,所述纳米量子点的悬浮液的OD600为30‑40;所述反应III的条件包括:温度为20‑40℃,时间为10‑60s。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述培养的条件包括:接种量为5‑12体积%,温度为25‑35℃,转速为150‑200rpm,时间为48‑120h。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述培养基含有碳源、氮源、无机盐离子和

2+ 2+ 2+ 2+ 2+ 2+

微量元素,所述微量元素选自Mn 、Zn 、Co 、Cu 、Ni 和Fe 中的任意一种或多种。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述培养基含有:40‑60g/L葡萄糖、0.3‑

0.5g/L酵母提取物、8‑12g/L Na2SO4、0.5‑1.5g/L (NH4)2SO4、2‑6g/L KH2PO4、0.1‑0.3g/L KCl、1‑3g/L MgSO4、15‑25g/L谷氨酸钠、0.05‑0.2g/L CaCl2、4‑8g/L Na2EDTA、0.15‑0.45g/L FeSO4、0.5‑1.5g/L MnCl2·4H2O、0.5‑1.5g/L ZnSO4、0.01‑0.02g/L CoCl2·6H2O、0.01‑

0.02g/L Na2MoO4·2H2O、0.02‑0.1g/L NiSO4·6H2O和0.2‑1g/L CuSO4·5H2O。

5.一种微生物油脂的制备方法,其特征在于,该制备方法包括:将产油微生物采用权利要求1至4中任意一项所述的方法进行培养得到培养液,将所述培养液进行破壁、提取。

6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述破壁采用破壁酶酶解的方式,所述破壁酶选自纤维素酶和/或蛋白酶;

相对于1L的所述培养液,所述破壁酶的用量为2‑4g;

所述提取溶剂为正己烷和/或乙醇。