1.高产赤霉素GA3的基因工程菌,由如下方法构建获得:以藤仓赤霉为底盘菌,将其基因组中编码氮源调控因子AreA的基因和编码全局调控因子Lae1的基因增强表达,获得所述高产赤霉素GA3的基因工程菌,所述底盘菌为藤仓赤霉(Fusarium fujikuroi)CCTCC NO: M
2019378;
所述方法包括:分别构建AreA和Lae1基因的体外组装完整基因表达盒,将其导入引入底盘菌为藤仓赤霉中,得到所述基因工程菌;
所述AreA基因的完整基因表达盒,用来源于pAN7‑1质粒的gpdA启动子和trpC终止子连接氮源调控因子的编码序列,所述氮源调控因子的编码序列如SEQ ID No.1所示,所述gpdA启动子核苷酸序列如SEQ ID No.2所示,所述trpC终止子核苷酸序列如SEQ ID No.3所示;
所述Lae1基因的完整基因表达盒,用来源于构巢曲霉的Ptef1启动子和Ttef1终止子连接全局调控因子的基因序列,所述全局调控因子的基因序列如SEQ ID No.4所示,所述Ptef1启动子核苷酸序列如SEQ ID No.5所示,所述Ttef1终止子核苷酸序列如SEQ ID No.6所示。
2.权利要求1所述基因工程菌在微生物发酵制备赤霉素GA3中的应用。
3.如权利要求2所述的应用,其特征在于所述应用为:将所述基因工程菌菌株接种于发酵培养基中,于25~30 ℃、200~300 rpm条件下进行发酵培养150~200 h获得含赤霉素GA3的发酵液,将发酵液分离纯化获得所述赤霉素GA3。
4.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述发酵培养基组成如下:玉米淀粉70 90 g/~L,米粉70 90 g/L,大豆粉10 30 g/L,花生粉10 30 g/L,硫酸钾 0.5 1.5 g/L,磷酸二氢钾~ ~ ~ ~
0.5 1.5 g/L,溶剂为水,pH自然,121度灭菌30 min。
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