1.一种基于RGO‑Ag‑ZnO‑PPy的丝素蛋白检测用电容型免疫传感器，其特征在于制备方法包括以下步骤：

步骤1：丝素蛋白的提取：将蚕茧先在Na2CO3水溶液中煮沸，再冲洗去除丝胶蛋白；将所得的丝素蛋白纤维在干燥后溶解于氯化钙混合溶液中；经透析、离心、冷冻干燥和研磨后，得到丝素蛋白；

步骤2：化学气相沉积ZnO纳米线：将ZnO粉和碳粉混合物放置在石英管中心反应区，在反应区前方放置涂有Au催化剂的硅片；加热反应，反应期间通以氩气和氧气的混合气作为载气；反应完成后，将ZnO纳米线分离，添加至异丙醇中，超声分散；

步骤3：氧化石墨烯的制备：将石墨纳米片加入到铬酸洗液中超声分散；然后40‑50 ℃下机械搅拌，倒入水，抽滤；洗涤，烘烤，冷至室温后，配制成氧化石墨烯浆料；

步骤4：RGO的制备：将上述氧化石墨烯浆料和氢碘酸的均匀混合物加热反应；洗涤后冷藏备用；

步骤5：功能层RGO‑Ag‑ZnO膜电极组装：将聚偏二氟乙烯多孔滤膜平铺；在膜表面依次涂覆步骤4所得RGO、Ag 纳米线的异丙醇溶液、步骤2所得ZnO纳米线分散液；真空干燥；将所得RGO‑Ag‑ZnO膜剥离；干燥，裁切，获得功能层RGO‑Ag‑ZnO膜电极；

步骤6：ITO导电玻璃集流器预处理：取ITO导电玻璃电极，超声清洗，干燥，将步骤5所得功能层RGO‑Ag‑ZnO膜电极粘于ITO导电玻璃电极的表面；

步骤7：电化学沉积聚吡咯：配制吡咯单体和KCl的混合溶液作为电解液；使用电化学工作站 CHI660E，以铂丝电极为对电极、银/氯化银电极为参比电极，用恒电流法在步骤6所得电极上电化学沉积聚吡咯，制得RGO‑Ag‑ZnO‑PPy复合材料；

步骤8：核壳结构CdSeQDs‑PDA@Ab2的制备：取巯基乙酸和水混合均匀，再加入氯化镉水溶液并搅拌均匀，调节pH为9.5‑10.5，然后通入氮气以除去溶液中的氧气，接着继续加入NaHSe溶液并搅拌均匀，然后将所得反应前驱液在氮气保护下加热反应，最后将所得亮黄色CdSeQDs溶液冷却至室温，离心清洗，加入聚多巴多胺，于30‑35℃下充分结合，冲洗，加入到含兔抗鼠抗丝素蛋白抗体Ab2的 BSA溶液中，孵育，冲洗，得到CdSeQDs‑PDA@Ab2，保存备用；

步骤9：活化ITO‑RGO‑Ag‑ZnO‑PPy膜电极：采用滴涂法在干燥后的步骤7所得RGO‑Ag‑ZnO‑PPy复合材料表面滴加MPA水溶液，孵育形成饱和MPA单层，用PBS缓冲液洗净，将所得修饰有MPA的电极浸泡在MES缓冲液中孵育，将MPA的末端羧基转化为活性NHS酯，用PBS缓冲液洗净，得到活化的ITO‑RGO‑Ag‑ZnO‑PPy膜电极；

步骤10：逐层自组装电容型免疫传感器：向活化的ITO‑RGO‑Ag‑ZnO‑PPy膜电极表面滴加步骤1所得丝素蛋白的CB液，使其端氨基与活化后的羧基结合，用PBS缓冲液彻底清洗去除未结合的抗原后，再用BSA溶液将电极封闭，以封闭电极表面可能存在的非特异性结合位点，取出后用PBS缓冲液洗净，继续滴加鼠抗丝素蛋白抗体Ab1溶液，置于25‑35℃下50‑70 min，用PBS缓冲液洗净未固定的鼠抗丝素蛋白抗体Ab1，最后滴加步骤8所得CdSeQDs‑PDA@Ab2，置于25‑35℃中50‑70 min，用PBS缓冲液洗净未固定的CdSeQDs‑PDA@Ab2，即得到丝素蛋白检测用电容型免疫传感器。

2. 如权利要求1所述的丝素蛋白检测用电容型免疫传感器，其特征在于：步骤2具体包括：将摩尔比为0.8‑1.2:1的ZnO粉和碳粉混合物放置在石英管中心反应区，在反应区前方放置涂有5‑10nm 的Au催化剂的硅片；设置反应温度为850‑950℃，反应时间15‑30 min，反应期间通以恒流流速为80‑120sccm的氩气、3‑7sccm的氧气作为载气；反应完成后，将ZnO纳‑1米线分离，按固液比2‑3 mg ml 添加至异丙醇中，超声10‑15 min使其均匀分散，保存备用。

3. 如权利要求1所述的丝素蛋白检测用电容型免疫传感器，其特征在于：步骤3具体包括：将100‑120mg片径为500‑800μm的石墨纳米片加入到560‑600 ml铬酸洗液中超声分散

30‑40 min；然后40‑50 ℃下机械搅拌10‑20 min，倒入1.5‑2L水，抽滤；抽滤物依次用水和‑1

乙醇洗涤 3‑5 次，110‑120℃烘烤3‑3.5h，冷至室温后，配制成20‑30mg ml 氧化石墨烯浆料，备用。

4. 如权利要求1所述的丝素蛋白检测用电容型免疫传感器，其特征在于：步骤4具体包括：按体积比8‑12:1将上述氧化石墨烯浆料和40‑50 wt%的氢碘酸的均匀混合物在85‑90℃下加热反应2‑2.5 h；依次用水和乙醇洗涤 3‑5 次，4℃冷藏备用。

5. 如权利要求1所述的丝素蛋白检测用电容型免疫传感器，其特征在于：步骤5具体包‑1

括：取步骤2 所得ZnO纳米线分散液40‑50 ml和2‑3 mg ml Ag 纳米线的异丙醇溶液40‑50 ml，分别超声分散均匀；打开真空抽滤系统的真空泵，将聚偏二氟乙烯多孔滤膜平铺在锥形瓶顶端并浸润；在膜表面依次涂覆步骤4所得RGO、Ag 纳米线的异丙醇溶液、步骤2所得ZnO纳米线分散液；30‑40℃真空干燥18‑24 h；将所得RGO‑Ag‑ZnO膜剥离，用水和乙醇清洗2‑3遍，去除可能的碘；干燥，裁切，获得功能层RGO‑Ag‑ZnO膜电极。

6. 如权利要求1所述的丝素蛋白检测用电容型免疫传感器，其特征在于：步骤6具体包括：取ITO导电玻璃电极，分别用丙酮、乙醇、去离子水超声清洗10‑20 min，50‑60℃干燥，将步骤5所得功能层RGO‑Ag‑ZnO膜电极粘于ITO导电玻璃电极的表面。

7. 如权利要求1所述的丝素蛋白检测用电容型免疫传感器，其特征在于：步骤7具体包括：配制0.03‑0.07 mmol/L吡咯单体和0.03‑0.07 mmol/L KCl的混合溶液50‑60 ml作为电解液；使用电化学工作站 CHI660E，以铂丝电极为对电极、银/氯化银电极为参比电极，用恒电流法在步骤6所得电极上电化学沉积聚吡咯， 电流8‑12 mA，沉积时间300‑500 s，制得RGO‑Ag‑ZnO‑PPy复合材料。

8. 如权利要求1所述的丝素蛋白检测用电容型免疫传感器，其特征在于：步骤8具体包括：取0.80‑0.88 ml巯基乙酸和55‑65 ml水混合均匀，再加入45‑55 mL 0.1M的氯化镉水溶液并搅拌均匀，调节pH为9.5‑10.5，然后通入氮气以除去溶液中的氧气，接着继续加入11‑

13 ml 0.2M的NaHSe溶液并搅拌均匀，然后将所得反应前驱液在氮气保护下75‑85℃反应3‑

5 h，最后将所得亮黄色CdSeQDs溶液冷却至室温，离心清洗，加入10‑20 ml聚多巴多胺，于‑1

30‑35℃下充分结合1‑3 h，冲洗3‑5 min，加入到含8‑12 ul ml 兔抗鼠抗丝素蛋白抗体Ab2的 BSA溶液中，于30‑35℃下孵育0.5‑1.5 h，冲洗3‑5 min，并置于1‑5℃条件下保存备用。

9. 如权利要求1所述的丝素蛋白检测用电容型免疫传感器，其特征在于：步骤9具体包括：采用滴涂法在干燥后的步骤7所得RGO‑Ag‑ZnO‑PPy复合材料表面滴加10‑20 ul 0.05M MPA水溶液，于50‑60℃中孵育50‑70min形成饱和MPA单层，用PBS缓冲液洗净，将所得修饰有MPA的电极浸泡在MES缓冲液中，55‑65℃中孵育50‑70 min，将MPA的末端羧基转化为活性NHS酯，用PBS缓冲液洗净，得到活化的ITO‑RGO‑Ag‑ZnO‑PPy膜电极。

10. 如权利要求1所述的丝素蛋白检测用电容型免疫传感器，其特征在于：步骤10具体包括：向活化的ITO‑RGO‑Ag‑ZnO‑PPy膜电极表面滴加10‑20 ul 1ul/ml步骤1所得丝素蛋白的CB液，使其端氨基与活化后的羧基结合，用PBS缓冲液彻底清洗去除未结合的抗原后，再用10‑20 ul的0.8‑1.2wt%BSA溶液将电极封闭25‑35 min，随后，用0.8‑1.2wt%的BSA溶液封闭0.5‑1.5 h，取出后用PBS缓冲液洗净，继续滴加10‑20 ul1ul/ml鼠抗丝素蛋白抗体Ab1溶液，置于25‑35℃下50‑70 min，用PBS缓冲液洗净未固定的鼠抗丝素蛋白抗体Ab1，最后滴加

10‑20 ul步骤8所得CdSeQDs‑PDA@Ab2，置于25‑35℃中50‑70 min，用PBS缓冲液洗净未固定的CdSeQDs‑PDA@Ab2，即得到丝素蛋白检测用电容型免疫传感器。