1.一种酵母菌与红曲霉的共培养促进红曲霉产孢的方法,其特征在于,将两种费比恩塞伯林德纳氏酵母按接种比1:1混合,并与红曲霉在平板上共培养。
2.根据权利要求1所述的酵母菌与红曲霉的共培养促进红曲霉产孢的方法,其特征在于,包括如下具体步骤:
(1)种子液的制备
两种酵母菌种子液的制备:将两种费比恩塞伯林德纳氏酵母菌株分别接种至麦氏培养基,并进行振荡培养;
红曲霉种子液的制备:将红曲霉孢子悬液接种至红曲霉种子培养基,并进行振荡培养;
(2)酵母菌与红曲霉共培养
在配制好的红曲霉平板中心挖孔,并用琼脂液填平孔底;待琼脂液凝固后,以上述孔为中心,采用三点法,将红曲霉种子液接种至红曲霉平板上;接着,取两种酵母菌种子液接入上述孔中,其中,两种酵母菌种子液的接种比为体积比1:1;最后,将接种完成的红曲霉平板静置培养。
3.根据权利要求2所述的酵母菌与红曲霉的共培养促进红曲霉产孢的方法,其特征在于,所述步骤(1)中,两种费比恩塞伯林德纳氏酵母菌株分别为费比恩塞伯林德纳氏酵母SHBCC D 54233菌株与ATCC 58045菌株。
4.根据权利要求2所述的酵母菌与红曲霉的共培养促进红曲霉产孢的方法,其特征在于,所述步骤(1)中,以2%的接种量将两种费比恩塞伯林德纳氏酵母菌株分别接种至麦氏培养基中,并于30℃、150r/min下振荡培养20~32h备用。
5.根据权利要求2所述的酵母菌与红曲霉的共培养促进红曲霉产孢的方法,其特征在于,所述步骤(1)中,麦氏培养基配方为:葡萄糖1g,酵母浸粉2.5g,无水乙酸钠8.2g,氯化钾
1.8g,定容于1L水中。
6.根据权利要求2所述的酵母菌与红曲霉的共培养促进红曲霉产孢的方法,其特征在6
于,所述步骤(1)中,以3%的接种量将浓度为5×10CFU/mL的红曲霉孢子悬液接种至红曲霉种子培养基中,32℃、150r/min下振荡培养48h备用。
7.根据权利要求2所述的酵母菌与红曲霉的共培养促进红曲霉产孢的方法,其特征在于,所述步骤(1)中,红曲霉培养基配方为:葡萄糖60g,蛋白胨20g,可溶性淀粉30g,定容于
1L水中。
8.根据权利要求2所述的酵母菌与红曲霉的共培养促进红曲霉产孢的方法,其特征在于,所述步骤(2)中,在配制好的红曲霉平板中心用1mL枪头挖孔,并用30μL琼脂液填平孔底;待琼脂液凝固后,以上述孔为中心,采用三点法,将红曲霉种子液以15μL的接种量接种至红曲霉平板上;取80μL总量的酵母菌种子液接入上述孔中,其中,两种酵母菌种子液的接种比为体积比1:1;最后,将接种完成的红曲霉平板置于32℃下静置培养。
9.根据权利要求2所述的酵母菌与红曲霉的共培养促进红曲霉产孢的方法,其特征在于,所述步骤(2)中,红曲霉平板的培养基配方为:葡萄糖60g,蛋白胨20g,可溶性淀粉30g,琼脂15g,定容于1L水中。
10.根据权利要求2~9任一所述的酵母菌与红曲霉的共培养促进红曲霉产孢的方法,其特征在于,酵母菌与红曲霉共培养后,通过以下方法测定红曲霉平板上的红曲霉产孢量:酵母菌与红曲霉共培养7d后,将平板中央的混菌区挖出,并用琼脂填充;接着,用5mL含有
0.05%吐温80的生理盐水洗下平板上的孢子,取3mL孢子液用血球计数板进行计数;计数两次,取平均值。