利索能及
我要发布
收藏
专利号: 2021113420453
申请人: 滁州学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种Hoshinoamide A的全固相合成方法,其特征在于,包括以下步骤:

步骤一:将Fmoc‑Pro‑OH偶联到2‑CTC树脂上,得到Fmoc‑Pro‑2‑CTC树脂;

步骤二:脱除Fmoc‑Pro‑2‑CTC树脂的Fmoc保护基团,所得H‑Pro‑2‑CTC树脂与Fmoc‑N‑Me‑D‑Phe‑OH在缩合条件下偶联得到Fmoc‑N‑Me‑D‑Phe‑Pro‑2‑CTC树脂;

步骤三:根据Hoshinoamide A肽序,对Fmoc‑N‑Me‑D‑Phe‑Pro‑2‑CTC树脂按照步骤二的方法依次进行偶联,偶联顺序为:Fmoc‑Val‑OH、Fmoc‑Gln(Trt)‑OH、Fmoc‑N‑Me‑D‑Val‑OH、Fmoc‑Ile‑OH、Fmoc‑N‑Me‑Leu‑OH、Fmoc‑Aha‑OH,以及Fmoc‑Hba(tBu)‑OH,得到多肽树脂1;

步骤四:裂解多肽树脂1,得到多肽2;

步骤五:在缚酸剂的作用下,对多肽2进行甲基化处理,得到Hoshinoamide A粗品;

步骤六:脱除所述Hoshinoamide A粗品的Fmoc保护基团,再经HPLC纯化、冻干,得到Hoshinoamide A;

步骤一具体包括以下步骤:将2‑CTC树脂置于DCM和DMF的混合溶剂中,再加入Fmoc‑Pro‑OH以及碱液,进行偶联反应2h~10h;所得偶联产物经DIPEA、MeOH、DMF的混合物纯化处理2h~8h,得到Fmoc‑Pro‑2‑CTC树脂;所述DCM和DMF的混合溶剂中DCM和DMF的体积比为1:(1~5);所述2‑CTC树脂的载量为0.2mmol/g~1.2mmol/g;所述碱液包括DIPEA、NMM、TEA中的任一种;所述DIPEA、MeOH、DMF的混合物中DIPEA、MeOH、DMF的体积比为1:(1~5):(5~

10);

所述2‑CTC树脂中苯丙氨酸、Fmoc‑Pro‑OH、碱液的摩尔比为1:(2~5):(2~6);所述DIPEA、MeOH、DMF的混合物与所述2‑CTC树脂的质量体积比为(3mL~4mL):1g;

步骤二中,所述缩合条件下采用的缩合剂包括:PyBOP/HOAt/DIPEA、HATU/DIPEA、Bop‑Cl/NMM、Bop‑Cl/DIPEA、DIC/HOBt、HBTU/HOAt/DIPEA中的任一种;偶联时间为0.5h~5h;

步骤二中,所述脱除Fmoc‑Pro‑2‑CTC树脂的Fmoc保护基团具体为:采用含有哌啶的DMF溶液脱除Fmoc‑Pro‑2‑CTC树脂的Fmoc保护基团;所述含有哌啶的DMF溶液中哌啶的体积分数为10%~20%;所述Fmoc‑Pro‑2‑CTC与含有哌啶的DMF溶液的质量体积比为1g:18mL~

30mL;

所述缩合条件下缩合剂与Fmoc‑N‑Me‑D‑Phe‑OH的摩尔比是(1~6):1;

步骤三中,偶联所述Fmoc‑Val‑OH时,采用Bop‑Cl/DIPEA缩合剂进行缩合;偶联所述Fmoc‑Gln(Trt)‑OH、Fmoc‑N‑Me‑D‑Val‑OH、Fmoc‑N‑Me‑Leu‑OH、Fmoc‑Hba(tBu)‑OH时采用HATU/DIPEA缩合剂进行缩合;偶联所述Fmoc‑Ile‑OH、Fmoc‑Aha‑OH时,采用Bop‑Cl/NMM缩合剂进行缩合;

步骤四中,所述裂解采用的裂解剂为质量百分数为0.5%~1.0%的TFA的DCM溶液;所述多肽树脂1与裂解剂的质量体积比为1g:(20mL~50mL);所述裂解时间为1.5h~3h;

步骤五中,所述缚酸剂包括:DIPEA、K2CO3、TEA、Na2CO3中的任一种或几种;所述甲基化采用的甲基化试剂包括MeI、DMS、CH3OTs、CH3OTf中的任一种;所述甲基化试剂与多肽2的摩尔比为(1~5):1;所述缚酸剂与甲基化试剂的摩尔比为1:1;所述甲基化处理的时间为10h~

18h;

步骤六中,脱除所述Hoshinoamide A粗品的Fmoc保护基团的试剂为TFA、Et3SiH、H2O以

95%、2.5%、2.5%的体积比混合得到的混合试剂;所述HPLC纯化为反相C4、C8或C18高效液相色谱纯化,柱温为20℃~50℃。