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专利号: 2021112046773
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种提高里氏木霉产酶能力的方法,其特征在于,所述方法是对里氏木霉的vps21基因进行敲除;

所述vps21基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示;所述酶为纤维素酶和/或β‑葡萄糖苷酶,以里氏木霉Rut‑C30为出发菌株。

2. 产酶能力提高的里氏木霉,其特征在于,所述里氏木霉敲除或缺失了vps21基因;所述vps21基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示,以里氏木霉Rut‑C30为出发菌株。

3.根据权利要求2所述的里氏木霉,其特征在于,所述敲除是采用同源重组双交换的基因敲除方式。

4.根据权利要求3所述的里氏木霉,其特征在于,所述敲除是利用潮霉素抗性基因hyg分别替换vps21基因。

5.构建权利要求2 4任一所述里氏木霉的方法,其特征在于,具体方法为:~

(1)克隆vps21上、下游基因片,克隆hyg表达框,酶切获得载体骨架区域,分别将2个小片段与载体骨架进行同源重组连接,构建成重组质粒pDelvps21;

(2)将步骤(1)构建的重组质粒转化农杆菌AGL1,挑取转化子与里氏木霉Rut‑C30进行共培养转化,筛选得到通过双交换整合到vps21位点的敲除菌株。

6.权利要求2 4任一所述里氏木霉在发酵产纤维素酶和/或β‑葡萄糖苷酶中的应用。

~

7. 一种生产纤维素酶的方法,其特征在于,将权利要求2 4任一所述的里氏木霉于25~ ~

30℃培养至少72 h,收集细胞培养液中的纤维素酶。

8.权利要求2 4任一所述的里氏木霉在木质纤维素降解中的应用。

~