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专利号: 2021108682615
申请人: 湖南福来格生物技术有限公司
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种酪氨酸酶突变体,其特征在于:是对SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列进行突变,突变的氨基酸位点包括N205D、D166E、D167G、V285I中的一个或多个。

2.根据权利要求1所述的突变体,其特征在于:突变方式包括以下10种中任一种:N205D;D166E;D167G;V285I;N205D和D166E;N205D和D167G;N205D和V285I;N205D和D166E和D167G;N205D和D166E和V285I;N205D和D166E和D167G和V285I。

3.根据权利要求2所述的突变体,其特征在于:突变方式包括以下7种中任一种:N205D;N205D和D166E;N205D和D167G;N205D和V285I;N205D和D166E和D167G;N205D和D166E和V285I;N205D和D166E和D167G和V285I。

4.根据权利要求2所述的突变体,其特征在于:序列依次如SEQ ID NO.2‑11所示。

5.一种编码权利要求1‑4任一项所述的酪氨酸酶突变体的核苷酸。

6.权利要求1‑4任一项所述的酪氨酸酶突变体的应用,其特征在于,以儿茶素类为底物,在有氧的条件下,催化合成茶黄素类产物。

7.根据权利要求6所述的应用,儿茶素类主要底物包括:表儿茶素、表没食子儿茶素、表儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶素没食子酸酯,反应底物与合成产物为如下任一种:表儿茶素+表没食子儿茶素生成茶黄素TF1;

表儿茶素+表没食子儿茶素没食子酸酯生成茶黄素‑3‑没食子酸酯TF2a;

表儿茶素没食子酸酯+表没食子儿茶素生成茶黄素‑3’‑没食子酸酯TF2b;

表儿茶素没食子酸酯+表没食子儿茶素没食子酸酯生成茶黄素双没食子酸酯TF3。

8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于:所述的反应体系中,所述的酪氨酸酶突变体活力为200‑500U/L,EC、EGC、EGCG均为10‑100mM,ECG为2‑10mM。

9.根据权利要求7所述的应用,其特征在于:反应温度为25‑35℃,反应pH为4.0‑6.0,反应搅拌转速为150‑200r/min,反应时间为10‑60min。

10.根据权利要求7所述的应用,其特征在于:所述的酪氨酸酶突变体是固定化的酪氨酸酶突变体。