1. 一种基于铜纳米颗粒的检测赭曲霉毒素A的生物传感器,其特征在于,包括赭曲霉毒素A的适配体Apt、触发链Tr、发夹探针H1、CuSO4、MOPs 缓冲液 、TM缓冲液、发夹探针H2以及形成四面体的DNA链S1、S2、S3、S4和封闭链B;
所述赭曲霉毒素A的适配体Apt的序列为SEQ ID No:1;
所述触发链Tr的序列为SEQ ID No:2;
所述发夹探针H1的序列为SEQ ID No:3;
所述发夹探针H2的序列为SEQ ID No:4;
所述S1的序列为SEQ ID No:5;
所述S2的序列为SEQ ID No:6;
所述S3的序列为SEQ ID No:7;
所述S4的序列为SEQ ID No:8;
所述封闭链B的序列为SEQ ID No:9;
所述的S2、S3、S4链的5’ 端修饰有巯基‑SH。
2.根据权利要求1所述的检测赭曲霉毒素A的生物传感器,其特征在于,赭曲霉毒素A与赭曲霉毒素A的适配体Apt特异性结合,释放触发链Tr,在电极上依次进行链置换暴露封闭链B、杂交链式反应捕获大量CuNP及其溶解导致电位变化产生电化学信号。
3.一种权利要求1所述的检测赭曲霉毒素A的生物传感器的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)铜纳米颗粒CuNP的制备:H1、CuSO4在 MOPs 缓冲液中混合,再加入还原剂抗坏血酸钠,合成铜纳米颗粒H1‑CuNP;H2、CuSO4在 MOPs 缓冲液中混合,再加入还原剂抗坏血酸钠,合成铜纳米颗粒H2‑CuNP;
(2)对电极进行预处理;
(3)DNA四面体制备及其修饰到步骤(2)处理的电极表面:将S1、S2、S3、S4和封闭链B在TM缓冲液中混合,得到DNA四面体;将制备好的DNA四面体与三(2‑羧乙基)膦注入电极,在室温下反应;
(4)均相反应产生触发链Tr:赭曲霉毒素A的适配体Apt和触发链Tr,振荡,形成拱形探针AP;灭菌水,5×PBS缓冲液,拱形探针AP,赭曲霉毒素A孵育;
(5)电极上的链置换、杂交链式反应、CuNP的捕获及其溶解反应:将步骤(4)得到的触发链Tr、H1‑CuNP和H2‑CuNP,滴加到步骤(3)的电极上,反应,清洗。
4.根据权利要求3所述的检测赭曲霉毒素A的生物传感器的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)预处理过程为:电极在氧化铝浆中进行抛光处理,直到呈镜面,用PBS和二次水反复冲洗。
5.根据权利要求3所述的检测赭曲霉毒素A的生物传感器的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)DNA四面体的制备方法为:将等摩尔量的DNA四面体五条链混合在TM缓冲液中,在
95℃反应,再逐渐冷却到4℃。
6.根据权利要求3所述的检测赭曲霉毒素A的生物传感器的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)将DNA四面体修饰到电极表面的过程为:将制备好的DNA四面体与三(2‑羧乙基)膦(TCEP)注入电极,在室温下反应过夜。
7.根据权利要求3所述的检测赭曲霉毒素A的生物传感器的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)的电极为金电极。
8.权利要求3所述的制备方法制备的检测赭曲霉毒素A的生物传感器在检测食品、环境中赭曲霉毒素A上的应用。
9. 根据权利要求8所述的应用,其特征在于,以Ag/AgCl为参比电极,以Pt电极为对电极,电位设置为‑0.2到0.6V,电位增加0.004 V,振幅为50 mV,脉冲宽度0.05 s,脉冲周期为
0.5 s,沉积电位‑0.5 V,沉积时间6min;采用差分脉冲溶出伏安法读取CuNP电信号的变化,检测待测目标物。