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专利号: 2018100658103
申请人: 西南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.双[2,4,6-三氯苯基]草酸酯在测定赭曲霉毒素A中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述测定使用化学发光酶联免疫分析法。

3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:所述化学发光是基于双[2,4,6-三氯苯基]草酸酯─H2O2─3-(4-羟苯基)丙酸二聚体化学发光体系。

4.基于双[2,4,6-三氯苯基]草酸酯检测赭曲霉毒素A的方法,其特征在于,包括如下步骤:在酶标板中包被赭曲霉毒素A抗原,封闭后加入OTA标准品作为竞争抗原,然后加入赭曲霉毒素A一抗,再加入酶标二抗孵育,加入过氧化脲与3-(4-羟苯基)丙酸混合液酶催化反应后,转移至另一白色酶标板中,加入含咪唑的过氧化脲,混匀后加入双[2,4,6-三氯苯基]草酸酯乙腈溶液显色,酶标仪检测。

5.根据权利要求4所述基于双[2,4,6-三氯苯基]草酸酯检测赭曲霉毒素A的方法,其特征在于:所述包被为将浓度为0.5~1.5μg/mL的BSA修饰赭曲霉毒素A加入酶标板中,4℃过夜。

6.根据权利要求4所述基于双[2,4,6-三氯苯基]草酸酯检测赭曲霉毒素A的方法,其特征在于:所述封闭为将脱脂奶粉溶液于37℃温育1h;甩板后在滤纸上拍干,PBST洗板2次,每次3min,所述脱脂奶粉溶液为每1.0g脱脂奶粉溶于20mL PBST的溶液。

7.根据权利要求4所述基于双[2,4,6-三氯苯基]草酸酯检测赭曲霉毒素A的方法,其特征在于:所述一抗使用浓度为稀释10000~40000倍。

8.根据权利要求4所述基于双[2,4,6-三氯苯基]草酸酯检测赭曲霉毒素A的方法,其特征在于:所述酶标二抗孵育为将HRP标记的羊抗鼠抗体稀释2000~4000倍,温育,甩板后在滤纸上拍干,PBST洗板5次,每次至少3min。

9.根据权利要求4所述基于双[2,4,6-三氯苯基]草酸酯检测赭曲霉毒素A的方法,其特征在于:所述酶催化反应为将过氧化脲与3-(4-羟苯基)丙酸混合,控制pH值为6.0,温育5~

30min;混合后所述过氧化脲浓度为5.0×10-3~13×10-3mol/L;所述3-(4-羟苯基)丙酸浓度为5×10-3~13×10-3mol/L。

10.根据权利要求4所述基于双[2,4,6-三氯苯基]草酸酯检测赭曲霉毒素A的方法,其特征在于:所述显色为加入含咪唑的过氧化脲溶液,溶液中过氧化脲浓度为0.5~4mol/L,所述咪唑浓度为2×10-3mol/L,混匀后加入浓度为5~20×10-3mol/L的双[2,4,6-三氯苯基]草酸酯乙腈溶液。