1.一种牛Ⅰ型胶原蛋白纯化方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)在10‑37℃下将粗提取的牛Ⅰ型胶原蛋白溶解,与非胶原蛋白酶的蛋白水解酶混合搅拌,酶解12‑24h,使用流变仪监测粘度变化,酶解完成后离心,取上清液;其中,反应液粘度达到0.01‑1Pa·S表示酶解完成;所述粗提取的牛Ⅰ型胶原蛋白为经酸提取法提取得到的牛Ⅰ型胶原蛋白;所述非胶原蛋白酶的蛋白水解酶与牛Ⅰ型胶原蛋白的质量比为0.1‑10:1;
所述非胶原蛋白酶的蛋白水解酶选自胃蛋白酶、胰蛋白酶和木瓜蛋白酶中的一种或多种;
(2)将步骤(1)的上清液pH调节至3.5‑5,依次滴加终浓度为15‑25%v/v、30‑45%v/v、50‑
70%v/v和75‑95%v/v的醇溶液,依次析出4个胶原蛋白沉淀,合并后得到去端肽牛Ⅰ型胶原蛋白沉淀;其中,醇溶液的滴加速度为50‑100ml/h;
(3)将步骤(2)的去端肽牛Ⅰ型胶原蛋白沉淀在pH2‑4的酸溶液中复溶,调节至等电点,离心取沉淀,再次在pH2‑4的酸溶液中复溶,在pH3‑5的酸溶液中透析,过滤除菌,取滤液,得到纯化后的牛Ⅰ型胶原蛋白,其中,透析袋的截留分子量为8‑100kDa。
2.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于:在步骤(2)中,依次滴加终浓度为20‑
25%v/v、40‑45%v/v、60‑65%v/v和80‑85%v/v的醇溶液。
3.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于:在步骤(2)中,每个胶原蛋白级分析出后进行离心,得到所述去端肽牛Ⅰ型胶原蛋白沉淀,收集上清液旋蒸浓缩并进行下一个级分的醇沉处理。
4.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于:在步骤(2)中,所述醇溶液选自甲醇、乙醇、丙酮和异丙醇中的一种或多种。
5.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于:在步骤(2)中,在1‑10℃下滴加醇溶液。
6.一种权利要求1‑5任一项所述的纯化方法在制备食品、化妆品或生物医学材料中的应用。