1.一种检测筛查新冠病毒N439K突变的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括：两组RT‑RAA扩增引物：

RT‑RAA上游引物为：

5’‑GAAATTAATACGACTCACTATAGGGcgctccagggcaaactggaaagattgctg‑3’；

则RT‑RAA下游引物为：5’‑aaggtttgagattagacttcctaaacaatc‑3’；

或者：

RT‑RAA上游引物为：

5’‑cgctccagggcaaactggaaagattgctg‑3’；

则RT‑RAA下游引物为：5’‑aaggtttgagattagacttcctaaacaatc‑3’；

三种CRISPR特异性检测的crRNA：K1 crRNA :

5’‑ gauuuagacuaccccaaaaacgaaggggacuaaaacagaaucuuagaauuccaagcuauaacgc ‑3’；

P1 crRNA：

5’‑ gauuuagacuaccccaaaaacgaaggggacuaaaacagaauuuuagaauuccaagcuauaacgc‑3’；

B2 crRNA:

5’‑uaauuucuacuaaguguagauagaauuccaagcuauaacgc‑3’；

RNA荧光探针：

5’‑FAM‑mArArUrGrGrCmAmArArUrGrGrCmA‑BHQ1‑3’；

其中，m代表2位氧甲基修饰，r代表核糖核苷酸；

DNA荧光探针：

5’ ‑FAM‑TTATTATT‑BHQ1‑3’。

2.根据权利要求1所述的检测筛查新冠病毒N439K突变的试剂盒，其特征在于：还包括buffer A溶液和BufferB溶液；buffer A溶液配置方法为：向1L水中加入50mmol的Tris缓冲液，100nmol的醋酸钾，20g的聚乙二醇粉末和2mmol二硫苏糖醇；BufferB溶液为浓度为

280mM的醋酸镁溶液。

3.根据权利要求1所述的检测筛查新冠病毒N439K突变的试剂盒，其特征在于：还包括：HEPES缓冲液、MgCl2溶液、10×NEB buffer2.1缓冲液、RNase inhibitor、T7 RNA polymerase、无RNA酶水。

4.一种非诊断目的的检测筛查新冠病毒N439K突变的方法，其特征在于：包括下列步骤：

步骤1：将待检测样本浸入病毒保存液中，然后用RNA提取试剂盒进行核酸提取，得到待检核酸；

步骤2：向一容纳有蛋白酶冻干粉的反应管中，加入41.5μL的buffer A溶液，2μL的RT‑RAA上游引物，2μL的RT‑RAA下游引物以及2μL待检核酸，然后加2.5μL的BufferB溶液，盖上反应管的管盖后进行扩增反应，得到核酸扩增产物；

RT‑RAA上游引物为：

5’‑GAAATTAATACGACTCACTATAGGGcgctccagggcaaactggaaagattgctg‑3’；

则RT‑RAA下游引物为：5’‑aaggtttgagattagacttcctaaacaatc‑3’；

或者：

RT‑RAA上游引物为：

5’‑cgctccagggcaaactggaaagattgctg‑3’；

则RT‑RAA下游引物为：5’‑aaggtttgagattagacttcctaaacaatc‑3’；

步骤3：配置第一CRISPR反应混合液：将0.4μL的浓度为1M的HEPES缓冲液、0.18μL的浓度为1M的MgCl2溶液、0.8μL的浓度为10μM的rNTP mix、2μL的浓度为的63.2ng/μL的LwaCas13a、1μL的浓度为40 U/μL的RNase inhibitor、0.1μL的浓度为50 U/μL的T7 RNA polymerase、0.5μL的浓度为10ng/μL的K1 crRNA或P1 crRNA、0.2μL的浓度为100μM的RNA荧光探针和12.82μL的无RNA酶水混合；配置第二CRISPR反应混合液：将1μL的浓度为1μM的LbaCas12a、1μL的浓度为15ng/μL的B2 crRNA、2μL的10× NEB buffer2.1、0.1μL的浓度为

100μM的DNA荧光探针和12.9μL的无RNA酶水混合；

K1 crRNA：用于检测N439K‑G突变；

5’‑ gauuuagacuaccccaaaaacgaaggggacuaaaacagaaucuuagaauuccaagcuauaacgc ‑3’；

P1 crRNA：用于检测N439K‑A突变；

5’‑ gauuuagacuaccccaaaaacgaaggggacuaaaacagaauuuuagaauuccaagcuauaacgc‑3’；

B2 crRNA：用于检测N439K‑A突变；

5’‑uaauuucuacuaaguguagauagaauuccaagcuauaacgc‑3’；

RNA荧光探针：

5’‑FAM‑mArArUrGrGrCmAmArArUrGrGrCmA‑BHQ1‑3’ ；其中，m为2位氧甲基修饰，r为RNADNA荧光探针：

5’ ‑FAM‑TTATTATT‑BHQ1‑3’；

步骤4：取2μL步骤2得到的核酸扩增产物加入到步骤3配置得到的第一CRISPR反应混合液或第二CRISPR反应混合液，37℃孵育30分钟；通过下列方法进行判断：（1）、通过荧光定量PCR仪孵育并同时检测荧光，或直接水浴最后肉眼观察荧光变化；

（2）、在CRISPR反应孵育开始时使用qPCR仪器读取FAM通道下的荧光值，37℃孵育20个循环，每个循环间隔2分钟，每次循环结束记录一次荧光信号，通过最终荧光信号强度判断N439K检测结果，即荧光值大于3000代表N439K检测阳性，荧光值小于2000代表N439K检测阴性，若荧光值处于2000‑3000之间则重新检测一次，若荧光值依然为2000‑3000则判定N439K检测阳性；若现场无qPCR等荧光读取仪器，亦可等反应完成后将反应管置于激发波长为

485nm的透射光源下观察颜色变化确定检测结果；N439K检测阳性的反应管会发出黄绿色荧光，N439K检测阴性反应管则无荧光。

5.根据权利要求4所述的检测筛查新冠病毒N439K突变的方法，其特征在于：buffer A溶液配置方法为：向1L水中加入50mmol的Tris缓冲液，100nmol的醋酸钾，20g的聚乙二醇粉末和2mmol二硫苏糖醇； BufferB溶液为浓度为280mM的醋酸镁溶液。