1.一种高产D‑泛酸的基因工程菌，由如下方法构建获得：（1）以E. coli DPA8为底盘菌，将其基因组中的poxB基因敲除，得到重组菌株DPA8 △poxB，记为DPA8‑1；

（2）敲除菌株DPA8 △poxB中的pta基因，得到重组菌株DPA8△poxB/△pta，记为DPA8‑

2；

（3）将菌株DPA8△poxB/△pta基因组中ldhA基因敲除，得到重组菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA，记为DPA8‑3；

（4）将菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA基因组中plfB基因敲除，得到重组菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA△plfB，记为DPAN9；

（5）将菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA△plfB基因组中的pykA基因的启动子替换为Trc启动子，得到DPA8△poxB/△pta/△ldhA△plfB/ Trc‑pykA，记为DPAN10；

（6）将菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA△plfB/ Trc‑pykA基因组中的ilvN基因用ilvN突变基因（G59A+C60T+T62A+A63C+A64T+G66C）替换，得到重组菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA△plfB/ Trc‑pykA/ilvN*，记为DPAN10‑1；

（7）菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA△plfB/ Trc‑pykA/ilvN*基因组中的ilvH基因用ilvH突变基因（G41A+C50T）替换，得到重组菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA△plfB/ Trc‑pykA/ilvN*/ilvH*，记为DPAN10‑2或者DPAN11；

（8）将菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA△plfB/ Trc‑pykA/ Trc‑pykF/ilvN*/ilvH*基因组中的spoT基因用spoT突变基因（C868G+G869A+C870A+A874G+A876T）替换并使用trc启动子替换原生启动子，得到重组菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA△plfB/ Trc‑pykA//ilvN*/ilvH*/Trc‑spoT*，记为DPAN12；

（9）将菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA△plfB/ Trc‑pykA/ Trc‑pykF/ilvN*/ilvH*/Trc‑spoT*基因组中的lpd基因的启动子替换为Trc启动子，得到重组菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA△plfB/ Trc‑pykA/ilvN*/ilvH*/Trc‑spoT*/Trc‑lpd，记为DPAN13；

（10）将菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA△plfB/ Trc‑pykA/ilvN*/ilvH*/trc‑spoT*/trc‑lpd基因组中的ilvD基因的启动子替换为Trc启动子，得到重组菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA△plfB/ Trc‑pykA/ilvN*/ilvH*/Trc‑spoT*/Trc‑lpd/Trc‑ilvD，记为DPAN14；

（11）将菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA△plfB/Trc‑pykA/ilvN*/ilvH*/trc‑spoT*/Trc‑lpd/Trc‑ilvD基因组中的lacI基因敲除，得到重组菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA△plfB/Trc‑pykA/ilvN*/ilvH*/Trc‑spoT*/Trc‑lpd/Trc‑ilvD/△lacI，记为DPAN15，即所述高产D‑泛酸的基因工程菌。

2.构建权利要求1所述高产D‑泛酸的基因工程菌的方法，其特征在于所述方法如下：（1）运用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，将底盘菌E. coli DPA8基因组中的poxB基因敲除，得到重组菌株DPA8 △poxB，记为DPA8‑1；

（2）运用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，敲除菌株DPA8 △poxB中的pta基因，得到重组菌株DPA8△poxB/△pta，记为DPA8‑2；

（3）运用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，将菌株DPA8△poxB/△pta基因组中ldhA基因敲除，得到重组菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA，记为DPA8‑3；

（4）运用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，将菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA基因组中plfB基因敲除，得到重组菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA△plfB，记为DPAN9；

（5）运用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，将菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA△plfB基因组中的pykA基因的启动子替换为Trc启动子，得到DPA8△poxB/△pta/△ldhA△plfB/ Trc‑pykA，记为DPAN10；

（6）运用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，将菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA△plfB/ Trc‑pykA基因组中的ilvN基因用ilvN突变基因（G59A+C60T+T62A+A63C+A64T+G66C）替换，得到重组菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA△plfB/ Trc‑pykA/ilvN*，记为DPAN10‑1；

（7）运用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，将菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA△plfB/ Trc‑pykA/ilvN*基因组中的ilvH基因用ilvH突变基因（G41A+C50T）替换，得到重组菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA△plfB/ Trc‑pykA/ilvN*/ilvH*，记为或者DPAN11；

（8）运用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，将菌株DPA8△glk/△pta/△ldhA△plfB/ Trc‑pykA/ Trc‑pykF/ilvN*/ilvH*基因组中的spoT基因用spoT突变基因（C868G+G869A+C870A+A874G+A876T）替换并使用trc启动子替换原生启动子，得到重组菌株DPA8△glk/△pta/△ldhA△plfB/ Trc‑pykA//ilvN*/ilvH*/Trc‑spoT*，记为DPAN12；

（9）运用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，将菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA△plfB/Trc‑pykA/Trc‑pykF/ilvN*/ilvH* /Trc‑spoT*基因组中的lpd基因的启动子替换为Trc启动子，得到重组菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA△plfB/ Trc‑pykA/ilvN*/ilvH*/Trc‑spoT*/Trc‑lpd，记为DPAN13；

（10）运用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，将菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA△plfB/ Trc‑pykA/ilvN*/ilvH*/trc‑spoT*/trc‑lpd基因组中的ilvD基因的启动子替换为Trc启动子，得到重组菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA△plfB/Trc‑pykA/ilvN*/ilvH*/Trc‑spoT*/Trc‑lpd/Trc‑ilvD，记为DPAN14；

（11）运用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，将菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA△plfB/Trc‑pykA/ilvN*/ilvH*/trc‑spoT*/Trc‑lpd/Trc‑ilvD基因组中的lacI基因敲除，得到重组菌株DPA8△poxB/△pta/△ldhA△plfB/Trc‑pykA/ilvN*/ilvH*/Trc‑spoT*/Trc‑lpd/Trc‑ilvD/△lacI，记为DPAN15，即所述高产D‑泛酸的基因工程菌。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于所述底盘菌E. coli DPA8由如下方法构建获得：

（1）以Escherichia  . coli W3110 为出发菌株，运用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，将出发菌株Escherichia  . coli W3110基因组中的panC基因启动子替换为Trc启动子，得到重组菌株Escherichia . coli W3110/Trc‑panC，记为DPA1；

（2）运用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，将菌株DPA1基因组中panE基因启动子替换为Trc启动子，得到重组菌株Escherichia . coli W3110/Trc‑panCpanE，记为DPA2；

（3）运用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，将菌株DPA2基因组中panB基因启动子替换为Trc启动子，得到重组菌株Escherichia . coli W3110/Trc‑panCpanEpanB，记为DPA3；

（4）运用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，将菌株DPA3基因组中ilvC基因启动子替换为Trc启动子，得到重组菌株Escherichia . coli W3110/Trc‑panCpanEpanBilvC，记为DPA4；

（5）运用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，将菌株DPA4基因组中ilvG基因碱基序列第979、

980位分别引入碱基A、T，得到重组菌株Escherichia  .  coli  W3110/Trc‑panCpanEpanBilvC/ilvG*，记为DPA5；

（6）运用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，将菌株DPA5基因组中avtA基因敲除，得到重组菌株Escherichia . coli W3110/Trc‑panCpanEpanBilvC/ilvG*/△avtA，记为DPA6；

（7）运用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，将菌株DPA6基因组中ilvE基因起始密码子ATG突变为GTG，得到重组菌株Escherichia  . coli W3110/Trc‑panCpanEpanBilvC/ilvG*/△avtA/ilvE*，记为DPA7；

（8）运用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，将菌株DPA7基因组中coaA基因起始密码子ATG突变为GTG，得到重组菌株Escherichia  . coli W3110/Trc‑panCpanEpanBilvC/ilvG*/△avtA/ilvE*/coaA*，记为DPA8。

4.如权利要求2所述方法，其特征在于所述Trc启动子核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

5.权利要求1所述高产D‑泛酸的基因工程菌在微生物发酵制备D‑泛酸中的应用。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于所述应用为：将所述高产D‑泛酸的基因工程菌接种至发酵培养基中，于28~30 ℃、150~200 rpm条件下进行发酵培养至OD600=0.8~1.0，添加终浓度为0.1mM的IPTG，继续培养至48h，发酵结束后取发酵液上清分离纯化得到D‑泛酸；

所述发酵培养基组成如下：葡萄糖10 30 g/L、硫酸铵10 20g/L、磷酸二氢钾 0.5 1.5 g/L、~ ~ ~

硫酸镁 0.1 1.0g/L、酵母提取物 1 3 g/L、碳酸钙 5 20g/L，0.5 2 ml/L微量金属盐溶液，~ ~ ~ ~

溶剂为去离子水；微量金属盐溶液组成为：10 g/L CuCl2、10 g/L FeSO4·7H2O、1 g/L ZnSO4·7H2O、0.20 g/L CuSO4、0.02 g/L NiCl2·7H2O，溶剂为去离子水。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于所述发酵培养基组成如下：葡萄糖 20 g/L、硫酸铵16 g/L、磷酸二氢钾 0.8 g/L、硫酸镁 0.5 g/L、酵母提取物 2 g/L、碳酸钙 10 g/L，1 ml/L微量金属盐溶液，溶剂为去离子水。

8.如权利要求6所述的应用，其特征在于所述发酵培养基组成如下：葡萄糖 24 g/L、硫酸铵12 g/L、磷酸二氢钾 1.0 g/L、硫酸镁 0.5 g/L、酵母提取物 2 g/L、碳酸钙 10 g/L，1 ml/L微量金属盐溶液，溶剂为去离子水。