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专利号: 2021103546597
申请人: 大连工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一株农杆菌DL‑DNH01,分类命名为根瘤土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens),其特征在于:保藏编号CGMCC No.21308。

2.一种利用权利要求1所述农杆菌DL‑DNH01制备降解剂的方法,其特征在于,包括以下步骤:

S1、将农杆菌DL‑DNH01进行活化,在28‑32℃、100‑200rpm条件下恒温振荡培养18‑36h;

然后按10‑20%接种量接种,在20‑35℃、100‑200rpm条件下恒温振荡培养18‑36h,得到种子液;

3

S2、将所述种子液按10‑20%接种量接种于发酵装置中,在20‑35℃、通气量0.6‑1.0m /

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min,搅拌速率100‑200rpm条件下,发酵至菌体数量1×10‑6×10 CFU/mL,得到DL‑DNH01发酵产物;

S3、将所述DL‑DNH01发酵产物制成微胶囊。

3.根据权利要求2所述制备降解剂的方法,其特征在于,步骤S3中所述微胶囊的制备方法包括:

S1、取壳聚糖溶解在质量分数为1.0%的醋酸溶液中,然后加入终浓度1.0%的CaCl2,搅拌溶解,得到壳聚糖氯化钙混合溶液;

S2、配制2.5%质量浓度的海藻酸钠溶液,并将所述DL‑DNH01发酵产物组分按1:1比例溶于其中;

S3、再以2‑10滴/秒的速度滴加至所述壳聚糖氯化钙混合溶液中,边滴加边搅拌,滴加结束后,继续搅拌0.5h,过滤后用PBS洗涤1‑2次,收集微胶囊。

4.根据权利要求3所述微胶囊的制备方法,其特征在于,所述微胶囊湿润状态下粒径为

3‑5mm。

5.根据权利要求2所述制备降解剂的方法,其特征在于,步骤S2中所述DL‑DNH01发酵产物包括:DL‑DNH01含菌发酵液、DL‑DNH01发酵液上清、DL‑DNH01菌体悬液、DL‑DNH01细胞裂解液。

6.根据权利要求5所述制备降解剂的方法,其特征在于,所述DL‑DNH01含菌发酵液由所述DL‑DNH01发酵产物经干燥,用去离子水回调至原体积的1/20制成;所述DL‑DNH01发酵液上清由所述DL‑DNH01发酵产物在4000g转速下离心10min并收集发酵液上清,经干燥处理,用去离子水回调至原体积的1/20制成;所述DL‑DNH01菌体悬液由所述DL‑DNH01发酵产物在

4000g转速下离心10min并收集并收集菌体沉淀物,稀释至浓度20OD得到;所述DL‑DNH01细胞裂解液由所述DL‑DNH01菌体悬液经过细胞破壁得到。

7.根据权利要求6所述制备降解剂的方法,其特征在于,所述干燥方法包括冷冻真空干燥。

8.一株农杆菌及其发酵产物的应用,其特征在于,该农杆菌DL‑DNH01及其发酵产物用于降解氨基甲酸乙酯。

9.根据权利要求8所述农杆菌及其发酵产物的应用,其特征在于,用于酒精饮料中氨基甲酸乙酯的降解。

10.根据权利要求8所述农杆菌及其发酵产物的应用,其特征在于,用于发酵食物中氨基甲酸乙酯的降解。