1.大豆皱叶症抗性鉴定的KASP分子标记引物,其特征在于,所述KASP分子标记引物序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示。
2.大豆皱叶症抗性的基因分型方法,其特征在于,提取大豆基因组DNA,用SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示的KASP标记引物对提取的基因组DNA进行PCR扩增。
3.根据权利要求2所述的大豆皱叶症抗性的基因分型方法,其特征在于,所述PCR扩增方法为:PCR反应体系:DNA 2.5µL、KASP引物混合物 0.07μL、2×KASP Master mix 2.5μL;
PCR反应程序:94℃预变性15 min;94℃变性20 s,61‑55℃梯度PCR ,每循环降低0.6℃,共10个循环;94℃变性20 s,55℃复性及扩增60 s,共26个循环;
所述的KASP引物混合物包括FAM上游引物、HEX上游引物、通用下游引物和纯水。
4.根据权利要求3所述的大豆皱叶症抗性的基因分型方法,其特征在于,所述KASP引物混合物由浓度均为100µM的FAM上游引物、HEX上游引物、通用下游引物与纯水按6:6:15:23体积比混合而成。
5.如权利要求1所述的大豆皱叶症抗性鉴定的KASP分子标记引物在大豆皱叶症抗性鉴定中的应用。
6.根据权利要求5所述的KASP分子标记在大豆皱叶症抗性鉴定中的应用,其特征在于,所述鉴定方法如下:(1)获得待测样品基因组DNA;
(2)以基因组DNA为模板,利用权利要求1所述的KASP分子标记引物进行竞争性等位基因特异性PCR反应扩增;
(3)PCR反应结束后,收集每个反应孔产生的荧光信号,根据荧光信号的类型判断分子标记的基因型,进而鉴定出待鉴定个体的皱叶症抗性。
7.一种大豆皱叶症抗性检测试剂盒,其特征在于,包括权利要求1所述的大豆皱叶症抗性鉴定的KASP分子标记引物。