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专利号: 2020114863134
申请人: 广州辑因医疗科技有限公司
专利类型:发明专利
专利状态:授权未缴费
更新日期:2024-11-04
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种促进HSCs增殖并维持HSCs干性的方法,包括使HSCs体外接触含有STAT细胞信号传导通路的小分子抑制剂或者其它细胞信号通路小分子抑制剂的培养液;

所述含有STAT细胞信号传导通路的小分子抑制剂为Src靶点的小分子抑制剂。

2.根据权利要求1的方法,所述Src靶点的小分子抑制剂选自如下的一种或多种:Dasatinib、Quercetin、UM‑164、KX2‑391和KX1‑004。

3.根据权利要求1的方法,其中所述Src靶点的小分子抑制剂与所述其它细胞信号通路小分子抑制剂联合使用。

4.根据权利要求3的方法,其中,所述其它细胞信号通路小分子抑制剂选自以HDAC为靶点的小分子抑制剂、以PKC为靶点的小分子抑制剂和以JNK为靶点的小分子抑制剂中的一种或两种以上。

5.根据权利要求4的方法,其中,所述Src靶点的小分子抑制剂与以HDAC为靶点的小分子抑制剂、以PKC为靶点的小分子抑制剂或以JNK为靶点的小分子抑制剂联合使用。

6.根据权利要求5的方法,其中,所述Src靶点的小分子抑制剂与以HDAC为靶点的小分子抑制剂VPA、以HDAC为靶点的小分子抑制剂SAHA、以PKC为靶点的小分子抑制剂Enzastaurin或以JNK为靶点的小分子抑制剂JNK‑IN‑8联合使用。

7.根据权利要求6的方法,其中,所述Src靶点的小分子抑制剂为Dasatinib。

8.根据权利要求7的方法,其中,Dasatinib与VPA或SAHA联合使用。

9.根据权利要求1‑8任一项的方法,其中所述Src靶点的小分子抑制剂单独或与其它抑制剂的联合使用维持具有CD34+CD45+CD90+CD45RA‑CD38‑表型的HSCs的细胞占全部细胞中的比例超过8%。

10.根据权利要求1‑8任一项的方法,其中所述Src靶点的小分子抑制剂单独或与其它抑制剂的联合使用维持具有CD34+CD45+CD90+CD45RA‑CD38‑表型的HSCs的细胞占全部细胞中的比例超过10%。

11.根据权利要求1‑8任一项的方法,其中所述Src靶点的小分子抑制剂单独或与其它抑制剂的联合使用维持具有CD34+CD45+CD90+CD45RA‑CD38‑表型的HSCs的细胞占全部细胞中的比例超过15%。

12.根据权利要求1‑8任一项的方法,其中所述Src靶点的小分子抑制剂单独或与其它抑制剂的联合使用维持具有CD34+CD45+CD90+CD45RA‑CD38‑表型的HSCs的细胞占全部细胞中的比例超过20%。

13.根据权利要求1‑8任一项的方法,其中所述Src靶点的小分子抑制剂单独或与其它抑制剂的联合使用维持具有CD34+CD45+CD90+CD45RA‑CD38‑表型的HSCs的细胞占全部细胞中的比例超过25%。

14.根据权利要求1‑8任一项的方法,其中所述Src靶点的小分子抑制剂单独或与其它抑制剂的联合使用维持具有CD34+CD45+CD90+CD45RA‑CD38‑表型的HSCs的细胞占全部细胞中的比例超过30%。

15.根据权利要求1‑8任一项的方法,其中所述Src靶点的小分子抑制剂单独或与其它抑制剂的联合使用维持CD34+细胞占全部细胞中的比例超过65%。

16.根据权利要求1‑8任一项的方法,其中所述Src靶点的小分子抑制剂单独或与其它抑制剂的联合使用维持CD34+细胞占全部细胞中的比例超过70%。

17.根据权利要求1‑8任一项的方法,其中所述Src靶点的小分子抑制剂单独或与其它抑制剂的联合使用维持CD34+细胞占全部细胞中的比例超过75%。

18.根据权利要求1‑8任一项的方法,其中所述Src靶点的小分子抑制剂单独或与其它抑制剂的联合使用维持CD34+细胞占全部细胞中的比例超过80%。

19.根据权利要求1‑8任一项的方法,其中所述Src靶点的小分子抑制剂单独或与其它抑制剂的联合使用维持CD34+细胞占全部细胞中的比例超过85%。

20.一种用于维持HSCs干性的组合物,其包括含有STAT细胞信号传导通路的小分子抑制剂,所述含有STAT细胞信号传导通路的小分子抑制剂为Src靶点的小分子抑制剂;

所述组合物还包括其它细胞信号通路小分子抑制剂;所述其它细胞信号通路小分子抑制剂包括以HDAC为靶点的小分子抑制剂、以PKC为靶点的小分子抑制剂和以JNK为靶点的小分子抑制剂;

所述组合物还包括SFEMII培养基。

21.根据权利要求20的组合物,其中,所述Src靶点的小分子抑制剂选自如下的一种或多种:Dasatinib、Quercetin、UM‑164、KX2‑391和KX1‑004。

22.根据权利要求20所述的组合物,其中,所述其它细胞信号通路小分子抑制剂包括以HDAC为靶点的小分子抑制剂VPA、以HDAC为靶点的小分子抑制剂SAHA、以PKC为靶点的小分子抑制剂Enzastaurin和以JNK为靶点的小分子抑制剂JNK‑IN‑8。

23.根据权利要求20的组合物,其中,所述组合物还包括生长因子Flt‑3L、生长因子SCF、生长因子TPO和生长因子IL‑6。

24.根据权利要求20‑23任一项的组合物,其中,所述组合物维持具有CD34+CD45+CD90+CD45RA‑CD38‑表型的HSCs的细胞占全部细胞中的比例超过8%。

25.根据权利要求20‑23任一项的组合物,其中,所述组合物维持具有CD34+CD45+CD90+CD45RA‑CD38‑表型的HSCs的细胞占全部细胞中的比例超过10%。

26.根据权利要求20‑23任一项的组合物,其中,所述组合物维持具有CD34+CD45+CD90+CD45RA‑CD38‑表型的HSCs的细胞占全部细胞中的比例超过15%。

27.根据权利要求20‑23任一项的组合物,其中,所述组合物维持具有CD34+CD45+CD90+CD45RA‑CD38‑表型的HSCs的细胞占全部细胞中的比例超过20%。

28.根据权利要求20‑23任一项的组合物,其中,所述组合物维持具有CD34+CD45+CD90+CD45RA‑CD38‑表型的HSCs的细胞占全部细胞中的比例超过25%。

29.根据权利要求20‑23任一项的组合物,其中,所述组合物维持具有CD34+CD45+CD90+CD45RA‑CD38‑表型的HSCs的细胞占全部细胞中的比例超过30%。

30.根据权利要求20‑23任一项的组合物,其中,所述组合物维持CD34+细胞占全部细胞中的比例超过65%。

31.根据权利要求20‑23任一项的组合物,其中,所述组合物维持CD34+细胞占全部细胞中的比例超过70%。

32.根据权利要求20‑23任一项的组合物,其中,所述组合物维持CD34+细胞占全部细胞中的比例超过75%。

33.根据权利要求20‑23任一项的组合物,其中,所述组合物维持CD34+细胞占全部细胞中的比例超过80%。

34.根据权利要求20‑23任一项的组合物,其中,所述组合物维持CD34+细胞占全部细胞中的比例超过85%。

35.一种用于维持HSCs干性的组合物,包含选自如下的任一组合:SAHA+EPZ004777、SAHA+DZNeP、SAHA+Dasatinib、VPA+Dasatinib、SAHA+JNK‑IN‑8或SAHA+VPA;

其还包含SFEMII培养基。

36.权利要求35的组合物,其中所述组合物维持具有CD34+CD45+CD90+CD45RA‑CD38‑表型的HSCs的细胞占全部细胞中的比例超过8%。

37.权利要求35的组合物,其中所述组合物维持具有CD34+CD45+CD90+CD45RA‑CD38‑表型的HSCs的细胞占全部细胞中的比例超过10%。

38.权利要求35的组合物,其中所述组合物维持具有CD34+CD45+CD90+CD45RA‑CD38‑表型的HSCs的细胞占全部细胞中的比例超过15%。

39.权利要求35的组合物,其中所述组合物维持具有CD34+CD45+CD90+CD45RA‑CD38‑表型的HSCs的细胞占全部细胞中的比例超过20%。

40.权利要求35的组合物,其中所述组合物维持具有CD34+CD45+CD90+CD45RA‑CD38‑表型的HSCs的细胞占全部细胞中的比例超过25%。

41.权利要求35的组合物,其中所述组合物维持具有CD34+CD45+CD90+CD45RA‑CD38‑表型的HSCs的细胞占全部细胞中的比例超过30%。

42.权利要求35的组合物,其中所述组合物维持CD34+细胞占全部细胞中的比例超过

65%。

43.权利要求35的组合物,其中所述组合物维持CD34+细胞占全部细胞中的比例超过

70%。

44.权利要求35的组合物,其中所述组合物维持CD34+细胞占全部细胞中的比例超过

75%。

45.权利要求35的组合物,其中所述组合物维持CD34+细胞占全部细胞中的比例超过

80%。

46.权利要求35的组合物,其中所述组合物维持CD34+细胞占全部细胞中的比例超过

85%。

47.根据权利要求35‑46任一项的组合物,其中,所述组合物还包括生长因子Flt‑3L、生长因子SCF、生长因子TPO和生长因子IL‑6。

48.一种用于维持HSCs干性的组合物,包含选自如下的任一组合:SAHA+EPZ004777+DZNeP或SAHA+VPA+Dasatinib。

49.根据权利要求48的组合物,其中,所述组合物维持具有CD34+CD45+CD90+CD45RA‑CD38‑表型的HSCs的细胞占全部细胞中的比例超过8%。

50.根据权利要求48的组合物,其中,所述组合物维持具有CD34+CD45+CD90+CD45RA‑CD38‑表型的HSCs的细胞占全部细胞中的比例超过10%。

51.根据权利要求48的组合物,其中,所述组合物维持具有CD34+CD45+CD90+CD45RA‑CD38‑表型的HSCs的细胞占全部细胞中的比例超过15%。

52.根据权利要求48的组合物,其中,所述组合物维持具有CD34+CD45+CD90+CD45RA‑CD38‑表型的HSCs的细胞占全部细胞中的比例超过20%。

53.根据权利要求48的组合物,其中,所述组合物维持具有CD34+CD45+CD90+CD45RA‑CD38‑表型的HSCs的细胞占全部细胞中的比例超过25%。

54.根据权利要求48的组合物,其中,所述组合物维持具有CD34+CD45+CD90+CD45RA‑CD38‑表型的HSCs的细胞占全部细胞中的比例超过30%。

55.根据权利要求48的组合物,其中所述组合物维持CD34+细胞占全部细胞中的比例超过65%。

56.根据权利要求48的组合物,其中所述组合物维持CD34+细胞占全部细胞中的比例超过70%。

57.根据权利要求48的组合物,其中所述组合物维持CD34+细胞占全部细胞中的比例超过75%。

58.根据权利要求48的组合物,其中所述组合物维持CD34+细胞占全部细胞中的比例超过80%。

59.根据权利要求48的组合物,其中所述组合物维持CD34+细胞占全部细胞中的比例超过85%。

60.根据权利要求48‑59任一项的组合物,其中,所述组合物还包括SFEMII培养基、生长因子Flt‑3L、生长因子SCF、生长因子TPO和生长因子IL‑6。

61.根据权利要求22‑23任一项的组合物,其中每种抑制剂在培养基中的浓度为:Dasatinib:0.1μM‑50μM;

SAHA:10nM‑20μM;

VPA:10μM‑2000μM;

JNK‑IN‑8:0.1μM‑20μM;

EPZ004777:0.1μM‑50μM;

DZNeP:1nM‑500nM;

UM‑164:0.1μM‑1000μM;

KX2‑391:0.1nM‑1000nM;

KX1‑004:0.1μM‑1000μM。

62.根据权利要求22‑23任一项的组合物,其中每种抑制剂在培养基中的浓度为:Dasatinib:0.5μM‑40μM;

SAHA:20nM‑15μM;

VPA:10μM‑1500μM;

JNK‑IN‑8:0.5μM‑15μM;

EPZ004777:0.5μM‑40μM;

DZNeP:5nM‑400nM;

UM‑164:0.5μM‑500μM;

KX2‑391:1nM‑1000nM;

KX1‑004:1μM‑1000μM。

63.根据权利要求22‑23任一项的组合物,其中每种抑制剂在培养基中的浓度为:Dasatinib:0.5μM‑30μM;

SAHA:30nM‑10μM;

VPA:10μM‑1000μM;

JNK‑IN‑8:0.5μM‑10μM;

EPZ004777:0.5μM‑30μM;

DZNeP:10nM‑300nM;

UM‑164:1μM‑100μM;

KX2‑391:10nM‑500nM;

KX1‑004:10μM‑500μM。

64.根据权利要求22‑23任一项的组合物,其中每种抑制剂在培养基中的浓度为:Dasatinib:0.5μM‑10μM;

SAHA:0.1μM‑10μM;

VPA:100μM‑1000μM;

JNK‑IN‑8:1μM‑10μM;

EPZ004777:0.5μM‑10μM;

DZNeP:10nM‑250nM;

UM‑164:1μM‑10μM;

KX2‑391:10nM‑100nM;

KX1‑004:10μM‑100μM。

65.根据权利要求35‑46任一项的组合物,其中每种抑制剂在培养基中的浓度为:Dasatinib:0.1μM‑50μM;

SAHA:10nM‑20μM;

VPA:10μM‑2000μM;

JNK‑IN‑8:0.1μM‑20μM;

EPZ004777:0.1μM‑50μM;

DZNeP:1nM‑500nM。

66.根据权利要求35‑46任一项的组合物,其中每种抑制剂在培养基中的浓度为:Dasatinib:0.5μM‑40μM;

SAHA:20nM‑15μM;

VPA:10μM‑1500μM;

JNK‑IN‑8:0.5μM‑15μM;

EPZ004777:0.5μM‑40μM;

DZNeP:5nM‑400nM。

67.根据权利要求35‑46任一项的组合物,其中每种抑制剂在培养基中的浓度为:Dasatinib:0.5μM‑30μM;

SAHA:30nM‑10μM;

VPA:10μM‑1000μM;

JNK‑IN‑8:0.5μM‑10μM;

EPZ004777:0.5μM‑30μM;

DZNeP:10nM‑300nM。

68.根据权利要求35‑46任一项的组合物,其中每种抑制剂在培养基中的浓度为:Dasatinib:0.5μM‑10μM;

SAHA:0.1μM‑10μM;

VPA:100μM‑1000μM;

JNK‑IN‑8:1μM‑10μM;

EPZ004777:0.5μM‑10μM;

DZNeP:10nM‑250nM。

69.根据权利要求60的组合物,其中每种抑制剂在培养基中的浓度为:Dasatinib:0.1μM‑50μM;

SAHA:10nM‑20μM;

VPA:10μM‑2000μM;

EPZ004777:0.1μM‑50μM;

DZNeP:1nM‑500nM。

70.根据权利要求60的组合物,其中每种抑制剂在培养基中的浓度为:Dasatinib:0.5μM‑40μM;

SAHA:20nM‑15μM;

VPA:10μM‑1500μM;

EPZ004777:0.5μM‑40μM;

DZNeP:5nM‑400nM。

71.根据权利要求60的组合物,其中每种抑制剂在培养基中的浓度为:Dasatinib:0.5μM‑30μM;

SAHA:30nM‑10μM;

VPA:10μM‑1000μM;

EPZ004777:0.5μM‑30μM;

DZNeP:10nM‑300nM。

72.根据权利要求60的组合物,其中每种抑制剂在培养基中的浓度为:Dasatinib:0.5μM‑10μM;

SAHA:0.1μM‑10μM;

VPA:100μM‑1000μM;

EPZ004777:0.5μM‑10μM;

DZNeP:10nM‑250nM。