1.基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1:通过细乳液聚合法制备出含羧基的负载阿霉素(DOX)的纳米凝胶(NL@DOX);
步骤2:采用N‑羟基琥珀酰亚胺(NHS)、1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙烯)碳二亚酰胺酸盐(EDC)活化后,将氨基化石墨烯量子点与含有羧基基团的负载阿霉素(DOX)的纳米凝胶通过氨羧络合反应结合,再键合含有氨基的主动靶向药物赫赛汀(Hereceptin),制备得基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系(FNL@DOX@Herceptin)。
2.根据权利要求1所述的基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系的制备方法,其特征在于:所述的步骤1,包括如下具体步骤:A、将0.129g N‑异丙基丙烯酰胺(NIPAM)、0.009~0.03g聚丙烯酸(PAA)、0.02~0.08g十二烷基硫酸钠(SDS)和0.002~0.008g阿霉素(DOX)溶于100ml蒸馏水中,记作水相;将水相倒入避光处理的三口烧瓶中,将0.08~0.092g聚(乙二醇)甲基丙烯酸酯(MAPEG)和0.01~0.045g二乙烯苯(DVB)溶于3~7ml二甲亚砜(DMSO)中,记作油相;
B、将油相匀速滴加到水相中,同时机械搅拌1~3h,滴加完成后超声处理1~5h,得预乳液,将预乳液置于冰水混合物中超声细乳化10~35min,得细乳液;
C、向细乳液中通入氮气10~25min,升温至55~85℃,加入0.005~0.018g过硫酸钠(KPS),通入氮气10~25min,持续搅拌过夜,得到负载DOX的纳米凝胶(NL@DOX)。
3.根据权利要求2所述的基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系的制备方法,其特征在于:
所述步骤1A中,PAA为0.009g,SDS为0.04g,DOX为0.005g,MAPEG为0.08g,DVB为
0.0198g,DMSO为5ml;
所述步骤1B中,搅拌时间为2h,超声时间为3h,超声细乳化时间为20min;
所述步骤1C中,所述,第一次通入氮气的时间为15min,水浴升温为70℃,KPS为0.007g,第二次通入氮气的时间为15min。
4.根据权利要求1所述的基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系的制备方法,其特征在于:所述的步骤2,包括如下具体步骤:A、取8~20ml的负载DOX的纳米凝胶倒入避光处理的离心管中,加入N‑羟基琥珀酰亚胺(NHS),25℃条件下振荡20~40min,加入1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙烯)碳二亚酰胺酸盐(EDC),振荡1~3h,得到活化液;
B、将实验室自制的氨基化石墨烯量子点加入活化液中,再加入赫赛汀(Hereceptin)后振荡过夜,将产物用M=12000~16000的透析膜透析3~5天,得到基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系(FNL@DOX@Herceptin)。
5.根据权利要求4所述的基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系的制备方法,其特征在于:
所述步骤2A中,NHS为5.7mg,第一次室温振荡时间为30min,EDC为6.7mg,第二次室温振荡时间为2h;
所述步骤2B中,实验室自制的氨基化石墨烯量子点为40ul,赫赛汀(Hereceptin)为
0.4mg。
6.根据权利要求1或2或3所述的基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系的制备方法,其特征在于:
采用红外光谱仪、纳米粒度仪、透射电镜、荧光光谱仪对基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系进行基础性能表征;
通过紫外分光光度计、酶标仪、荧光显微镜等对基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系的药物负载情况、缓释性能进行研究,以及与乳腺癌MCF‑7细胞共培育用MTT法进行细胞毒性测试。
7.权利要求1‑6任一制备方法制备的基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系。