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专利号: 2020111552519
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-03-02
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种固定化酶催化合成苯丙氨酸寡肽‑赖氨酸寡肽共聚物的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:(1)合成赖氨酸寡肽和苯丙氨酸寡肽;

(2)制备苯丙氨酸寡肽‑赖氨酸寡肽共聚物,包括:在壬烷/二甲亚砜混合溶剂中加入步骤(1)得到的赖氨酸寡肽、苯丙氨酸寡肽以及固定化酶,在50 70℃下反应10 24 h,反应结~ ~束后,在反应混合物中加入六氟异丙醇,过滤取滤液,将滤液干燥后,加入无水乙醇浸泡12 小时,离心,去除上清液,再加入预热后的丙酮直至全部溶解,将所得溶液在0℃静置过夜,减压抽滤,所得沉淀即为苯丙氨酸寡肽‑赖氨酸寡肽共聚物;所述固定化酶通过以下方法制备:将蛋白酶用磷酸缓冲液配置成质量百分比为5 20%的蛋白质溶液,在蛋白质溶液中加入~大孔树脂后搅拌反应4~8 h,反应结束后将反应液在1000 5000rpm离心5 10分钟,收集沉~ ~淀冷冻干燥,即可制备得到固定化酶;其中,所述固定化酶的制备过程中,所述蛋白酶为菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶中的任一种;所述大孔树脂为HPD500、HPD700、AB‑8中的任一种。

2.根据权利要求1所述的一种固定化酶催化合成苯丙氨酸寡肽‑赖氨酸寡肽共聚物的方法,其特征在于,所述赖氨酸寡肽和苯丙氨酸寡肽的添加量与壬烷/二甲亚砜混合溶剂的质量g体积mL比为1:1 4,其中,赖氨酸寡肽与苯丙氨酸寡肽的质量比为1:0.8 1:1.2。

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3.根据权利要求1或2所述的一种固定化酶催化合成苯丙氨酸寡肽‑赖氨酸寡肽共聚物的方法,其特征在于,固定化酶的加入量为0.1~0.5 U/g底物,所述底物为赖氨酸寡肽和苯丙氨酸寡肽。

4.根据权利要求1所述的一种固定化酶催化合成苯丙氨酸寡肽‑赖氨酸寡肽共聚物的方法,其特征在于,所述合成赖氨酸寡肽的方法包括:在磷酸缓冲液中加入L‑赖氨酸甲酯盐酸盐和蛋白酶,反应混合物在20~50℃下反应6~12小时,反应结束后,在反应混合物中加入冰乙醇,离心取沉淀,并用冰乙醇洗涤,再次离心取沉淀,冷冻干燥后得到赖氨酸寡肽。

5.根据权利要求1所述的一种固定化酶催化合成苯丙氨酸寡肽‑赖氨酸寡肽共聚物的方法,其特征在于,所述合成苯丙氨酸寡肽的方法包括:在磷酸缓冲液中加入L‑苯丙氨酸甲酯盐酸盐、叔丁醇和蛋白酶,反应混合物在20~50℃下反应6~12小时,反应结束后,离心取上清液,在上清液中加入0℃冰乙醇,离心取沉淀,冷冻干燥后得到苯丙氨酸寡肽。

6.根据权利要求1所述的一种固定化酶催化合成苯丙氨酸寡肽‑赖氨酸寡肽共聚物的方法,其特征在于,所述缓冲溶液中蛋白质与大孔树脂的质量比为1:5~1:10。

7.权利要求1 6任一所述的一种固定化酶催化合成苯丙氨酸寡肽‑赖氨酸寡肽共聚物~

的方法在制备功能材料、食品或化妆品中的应用。