1.林生地霉(Geotrichum silvicola)ZJPH1811,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏日期为2020年7月6日,保藏编号:CCTCC NO:M 2020281,保藏地址:中国,武汉,武汉大学,邮编430072。
2.一种权利要求1所述林生地霉ZJPH1811在制备(S)‑1‑(2‑三氟甲基苯基)乙醇中的应用。
3.如权利要求2所述的应用,其特征在于所述的应用为:以林生地霉ZJPH1811经发酵培养获得的湿菌体为酶源,以2′‑三氟甲基苯乙酮为底物,加入辅助底物,于pH 6.0‑8.0的磷酸盐缓冲液中构成转化体系,在25‑40℃、100‑200rpm条件下进行反应,反应结束后,得到含产物(S)‑1‑(2‑三氟甲基苯基)乙醇的转化液,转化液经分离纯化,获得(S)‑1‑(2‑三氟甲基苯基)乙醇;所述辅助底物为葡萄糖、异丙醇、甘油或乙醇中的一种。
4.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述湿菌体用量以缓冲液体积计为100‑600g/L,所述底物用量以缓冲液体积计为5‑50mmol/L;所述辅助底物为葡萄糖、甘油时,加量以缓冲液体积计为10‑250g/L,所述辅助底物为异丙醇、乙醇时,体积加量以缓冲液体积计为10‑
30%。
5.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述转化体系中还含有天然低共熔溶剂,所述天然低共熔溶剂由氢键受体与氢键供体组成,包括:氯化胆碱:尿素、甜菜碱:异丙醇、甜菜碱:半胱氨酸、甜菜碱:海藻糖、氯化胆碱:谷氨酸、醋酸胆碱:半胱氨酸,所述天然低共熔溶剂的氢键受体与氢键供体的摩尔比均为1:1。
6.如权利要求5所述的应用,其特征在于所述天然低共熔溶剂质量加量以缓冲液体积计为2‑20g/L。
7.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述酶源按如下方法获得:
1)平板培养:挑取林生地霉ZJPH1811单菌落接种至平板培养基中,30℃活化培养2d,按相同步骤从第一次活化的平板上挑取菌落再活化培养一次,所得平板置4℃冰箱保存;平板培养基终浓度组成为:葡萄糖15g/L,蛋白胨20g/L,酵母膏10g/L,(NH4)2SO42g/L,KH2PO4 2g/L,NaCl 1g/L,MgSO4·7H2O 0.5g/L,琼脂20g/L,溶剂为水,pH 6.5;
2)种子培养:从培养成熟的平板中挑取一环菌体接入种子培养基中,30℃,200rpm培养
12h,获得种子液;所述种子培养基终浓度组成为:葡萄糖15g/L,蛋白胨20g/L,酵母膏10g/L,(NH4)2SO4 2g/L,KH2PO4 2g/L,NaCl 1g/L,MgSO4·7H2O 0.5g/L,溶剂为水,pH 6.5;
3)发酵培养:以体积浓度8%的接种量将种子液接种到发酵培养基中,30℃,200rpm培养24h,获得发酵液,将发酵液离心,所得沉淀用pH 7.0的K2HPO4‑KH2PO4缓冲液洗涤,离心后获得湿菌体,即为酶源;所述发酵培养基终浓度组成为:葡萄糖24.45g/L,蛋白胨15.75g/L,(NH4)2SO4 21.39g/L,无水CaCl2 1mM,溶剂为水,pH 6.5。