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专利号: 202010686541X
申请人: 鲁东大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-12-30
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种利用金属有机骨架材料制备贝类高F值寡肽的方法,其特征在于,包括贝类酶解、特异性金属有机骨架材料制备和芳香族氨基酸脱除;

所述的特异性金属有机骨架材料制备中:以铜为金属中心,以1,3,5-苯三甲酸为有机配体,负载Fe3O4磁性微球,获得特异性吸附芳香族氨基酸的磁性金属有机骨架材料;

所述的芳香族氨基酸脱除中:用特异性吸附芳香族氨基酸的磁性金属有机骨架对贝类酶解获得的产物进行处理,脱除芳香族氨基酸,获得高F值寡肽。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的特异性磁性金属有机骨架材料制备包括如下步骤:(1)磁性Fe3O4的制备;

(2)Fe3O4的硅烷化:以硅酸四丁酯为硅烷化剂,获得硅烷化Fe3O4磁性微球;

(3)磁性金属有机骨架制备:以铜为金属中心,1,3,5-苯三甲酸为有机配体,负载硅烷化Fe3O4磁性微球,获得特异性吸附芳香族氨基酸的磁性金属有机骨架材料。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,步骤(3)的工作条件为:a. 将步骤(2)获得的硅烷化Fe3O4磁性微球与三氯甲烷混合,加入溶有聚乙烯吡咯烷酮的三氯甲烷,搅拌反应10-12h后,用正己烷和水洗涤;

b. 将Cu(NO3)2·3H2O 和1,3,5-苯三甲酸溶解于N,N-二甲基甲酰胺中,持续搅拌30-

60min;

c. 将步骤(3a)与步骤(3b)获得的物料混合于容器,并将容器密封, 70-80℃反应24-

30h;

d. 将步骤(3c)获得的产物冷却至25 ℃以下,抽滤,将抽滤物经乙醇水溶液冲洗;

e. 将步骤(3d)所得抽滤物干燥,获得磁性金属有机骨架材料。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,

步骤(3a)中,硅烷化Fe3O4磁性微球与聚乙烯吡咯烷酮的质量比为1:(3-5);

步骤(3)中,硅烷化Fe3O4磁性微球:Cu(NO3)2·3H2O:1,3,5-苯三甲酸的质量比为1:(15-

20): (8-10)。

5.根据权利要求1-4任一项所述的方法,其特征在于,所述的贝类酶解中,依次对贝类原料进行内切酶酶解和外切酶酶解;

所述的内切酶酶解使用的酶是胃蛋白酶;所述的外切酶酶解使用的酶是风味蛋白酶。

6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述的胃蛋白酶与风味蛋白酶均为金属有机骨架固定化酶;

所述的固定化酶的制备方法为:将0.25-0.35 mol/L的硝酸锌溶液与酶混合,再加入

1.2-1.5 mol/L的2-甲基咪唑溶液,搅拌60-90 min,静置陈化3-5h;离心分离,得到白色固体,用去离子水洗涤并冷冻干燥。

7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,在制备固定化酶之前,对酶进行纯化;所述的纯化的工作条件为:将酶溶解于缓冲液,之后离心,取上清液;将上清液的pH值调整至酶的等电点,再加入硫酸铵至60%-75%饱和度;4℃以下静置12-18h,离心,取沉淀,4℃以下透析18-30h,冷冻干燥。

8.根据权利要求1-4任一项所述的方法,其特征在于,所述的芳香族氨基酸脱除的工作条件为:将所述的磁性金属有机骨架材料与酶解液按照1g:(30-40)mL混合,调节pH值至6-7,

25-40℃搅拌30-50min,获得高F值寡肽溶液。

9.一种贝类高F值寡肽,使用如权利要求1-4任一项所述的方法获得。

10.根据权利要求9所述的贝类高F值寡肽,其特征在于,其F值超过60。