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专利号: 2020105373051
申请人: 福建农林大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-12-01
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种鳗鱼抗炎糖肽的制备方法,其特征在于:包括鳗鱼头蛋白液的制备、动态高压微射流预处理、酶解、脉冲电场强化超滤膜分离、糖基化修饰和冷冻干燥的步骤;各步骤具体操作如下:

(1)鳗鱼头蛋白液的制备:将鳗鱼头清洗后烘干至水分含量小于10%,之后超微粉碎至过80目筛,再采用真空沸腾法从所得干粉中提取制备鳗鱼头蛋白液;

(2)动态高压微射流预处理:在步骤(1)制备的鳗鱼头蛋白液中加入NaCO3,调整其pH值为9,之后采用高压微射流纳米均质机内进行处理;

(3)酶解:利用碱性蛋白酶酶解步骤(2)预处理后的蛋白液,收集所得蛋白肽粗溶液;

(4)脉冲电场强化超滤膜分离:将步骤(3)所得的蛋白肽粗溶液离心除去沉淀后进行脉冲电场强化超滤膜处理,选择截留分子量为5kDa和3kDa的超滤膜进行超滤,得到分子量为

3000‑5000Da的多肽溶液;

(5)糖基化修饰:将步骤(4)所得多肽溶液置于高频超声场中,按肽:糖的质量比为1:3加入葡聚糖三糖,调节超声频率≥1.7MHz,超声功率为200‑400W,超声温度为50‑60℃,超声时间为20‑40min,得到糖肽溶液;

(6)冷冻干燥:将步骤(5)得到的糖肽溶液在‑80℃预冻1h,然后在‑80℃下继续冷冻干燥10 h,得到所述抗炎糖肽;

步骤(1)所述真空沸腾法提取鳗鱼头蛋白液的具体操作为:在所得干粉中加入其质量3倍的PBS缓冲液,50℃恒温条件下常压搅拌浸泡45min,之后抽真空至12kPa,让整个提取溶液处于沸腾临界状态20min,之后恢复至常压,再搅拌提取10min,去除表面油脂后对提取液进行离心分离,收集上清液即为鳗鱼头蛋白液。

2.根据权利要求1所述的鳗鱼抗炎糖肽的制备方法,其特征在于:步骤(2)中高压微射流纳米均质处理的条件参数为:高压喷头孔径为5mm、处理压力为100‑200MPa、处理温度为

35℃、处理时间为10‑30s、循环次数为5次。

3.根据权利要求1所述的鳗鱼抗炎糖肽的制备方法,其特征在于:步骤(3)中所用碱性蛋白酶与蛋白液的重量比为1:8‑1:15;酶解温度为40℃,酶解时间为60‑120min,酶解pH=8‑

10。

4.根据权利要求1所述的鳗鱼抗炎糖肽的制备方法,其特征在于:步骤(4)中脉冲电场的强度为650V/cm,频率为500Hz。

5.一种如权利要求1‑4所述任一方法制得的鳗鱼抗炎糖肽。