1.一种快速检测大肠杆菌O157：H7的双抗体夹心ELISA方法，其特征在于：以两株单克隆细胞株分别分泌的单克隆抗体2G12和单克隆抗体12B1作为配对抗体，分别用于特异性识别大肠杆菌O157：H7外膜蛋白OmpC膜外特异性多肽表位和大肠杆菌O157：H7脂多糖O特异性侧链，建立大肠杆菌O157：H7双抗体夹心ELISA方法，所述单克隆细胞株包括大肠杆菌O157：H7特异性细胞株SM6E8和大肠杆菌O157：H7特异性细胞株RCD，其分泌的单克隆抗体分别对应2G12和12B1；

所述大肠杆菌O157：H7特异性细胞株SM6E8于2019年12月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号CGMCC No.19164；所述大肠杆菌O157：H7特异性细胞株RCD于2019年12月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号CGMCC No.19163。

2.根据权利要求1所述的一种快速检测大肠杆菌O157：H7的双抗体夹心ELISA方法，其特征在于：所述单克隆抗体2G12用于识别大肠杆菌O157：H7外膜蛋白OmpC膜外两条相邻loop结构，分别为OmpC蛋白第296‑311个氨基酸，第256‑268个氨基酸，关键识别表位为第

302‑307个氨基酸，用于特异性捕获大肠杆菌O157：H7细菌。

3.根据权利要求1所述的一种快速检测大肠杆菌O157：H7的双抗体夹心ELISA方法，其特征在于：包括如下步骤：（一）制备特异性大肠杆菌O157：H7单克隆抗体：以大肠杆菌O157：H7煮沸抗原为免疫原，免疫6‑8周龄的BALB/c小鼠，经免疫、融合，筛选对大肠杆菌O157：H7强阳性的细胞进行亚克隆，获取大肠杆菌O157：H7特异性单克隆抗体；

（二）筛选配对单克隆抗体：纯化步骤（一）中获取的大肠杆菌O157：H7特异性单克隆抗体，并分别标记辣根过氧化物酶HRP，鉴定标记成功后进行夹心法配对；

（三）建立大肠杆菌O157：H7特异性夹心ELISA方法：将步骤（二）中获取的配对单克隆抗体，以2G12用作包被抗体，12B1用作检测抗体，酶标板上包被单克隆抗体2G12用于特异性捕获大肠杆菌O157：H7，并以酶标板上酶标抗体12B1‑HRP与捕获的大肠杆菌O157：H7结合，底物加入后被HRP酶催化并在450nm产生吸收值，根据P/N值判定结果，其中：若大肠杆菌O157：H7被包被抗体2G12捕获并与酶标抗体12B1‑HRP结合，并催化底物在450 nm产生吸收值P/N≥2.1，判定为阳性；若大肠杆菌O157：H7浓度过低P/N＜2.1被判定为阴性。

4.根据权利要求3所述的一种快速检测大肠杆菌0157：H7的双抗体夹心ELISA方法，其特征在于：所述步骤（三）具体检测步骤如下：（1）包被：用4μg/mL的2G12包被酶标板，用量100μL/孔，并于37℃温育2h；

（2）洗涤：用PBST洗板三次，每次3min，用量200μL/孔，然后甩干反应板；

（3）封闭：用含0.2%明胶的CBS封闭板孔，用量200μL/孔，于37℃封闭2h；

（4）洗涤：同步骤（2）；

（5）样品：用PBST将大肠杆菌O157：H7菌液按3倍梯度从109 CFU/mL连续稀释至5645 CFU/mL，另设一个PBST空白对照，每孔加入100μL样品，于37℃温育lh；

（6）洗涤：同步骤（2）；

（7）加2μg/mL酶标抗体12B1‑HRP，用量100μL/孔，并于37℃反应1h；

（8）洗涤：洗板四次；

（9）显色：按照TMB与底物液比例为1:5加显色液，用量100μL/孔，显色12min；

（10）终止：加终止液50μL/孔；

（11）测定：用酶标仪检测OD450nm。

5. 根据权利要求3所述的一种快速检测大肠杆菌O157：H7的双抗体夹心ELISA方法，其特征在于：所述步骤（二）配对参数包括4μg/mL包被抗体2G12，包被液为pH9.6、0.01M的碳酸盐缓冲液，标品浓度10^7 CFU/mL和10^6 CFU/mL，标品稀释液pH7.2、0.01M的PBST，酶标抗体稀释1000倍使用。

6.根据权利要求4所述的一种快速检测大肠杆菌O157：H7的双抗体夹心ELISA方法，其特征在于：所述步骤（三）中包被液为pH9.6、0.01M碳酸盐缓冲液，标品稀释液为pH7.2、

0.01M的PBST，酶标抗体12B1‑HRP浓度为2μg/mL。

7. 根据权利要求5所述的一种快速检测大肠杆菌O157：H7的双抗体夹心ELISA方法，其特征在于：所述标品包括ATCC 700728、CICC 21530、ATCC 35150三株大肠杆菌O157：H7 标准株。