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专利号: 2020105172989
申请人: 大连工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种附有胰蛋白酶的微孔膜的制备方法,其特征在于,包括步骤:S1、微孔膜PP的制备:在二氯甲烷中加入聚甲基丙烯酸甲酯和聚乙二醇-聚丙二醇-聚乙二醇,超声使其溶解,得微孔膜溶液;将所述微孔膜溶液滴在基底上,将所述基底置于20~30℃、湿度60~90%、放置6~10小时,在基底上形成的薄膜为微孔膜PP,得附有微孔膜PP的基底;

其中,所述微孔膜溶液中,聚甲基丙烯酸甲酯的浓度为4~8mg/mL,聚乙二醇-聚丙二醇-聚乙二醇的浓度为0.001~0.003mg/mL;所述基底是玻片、云母片或硅片;

S2、图案化微孔膜捕获胰蛋白酶:将胰蛋白酶用pH7.4的PBS缓冲溶液稀释至0.4~

0.6mg/mL,得Try溶液;将步骤S1所述附有微孔膜PP的基底浸泡于所述Try溶液,再用去离子水冲洗掉未吸附的胰蛋白酶;将基底上的微孔膜在空气中干燥,晾干后在基底上形成的薄膜为附有胰蛋白酶的微孔膜PPT。

2.根据权利要求1所述附有胰蛋白酶的微孔膜的制备方法,其特征在于,步骤S1所述微孔膜溶液中,聚甲基丙烯酸甲酯的浓度为6mg/mL,聚乙二醇-聚丙二醇-聚乙二醇的浓度为

0.001mg/mL。

3.根据权利要求1所述附有胰蛋白酶的微孔膜的制备方法,其特征在于,步骤S1所述超声频率40KHz,时间30秒。

4.根据权利要求1所述附有胰蛋白酶的微孔膜的制备方法,其特征在于,步骤S1所述湿度为85%,温度为25℃。

5.根据权利要求1所述附有胰蛋白酶的微孔膜的制备方法,其特征在于,步骤S1所述微孔膜溶液滴在基底上的体积为10μL。

6.根据权利要求1所述附有胰蛋白酶的微孔膜的制备方法,其特征在于,步骤S2所述浸泡的时间为15~30min。

7.根据权利要求1所述附有胰蛋白酶的微孔膜的制备方法,其特征在于,步骤S2所述干燥时间为12~24h。

8.根据权利要求1所述附有胰蛋白酶的微孔膜的制备方法,其特征在于,包括步骤:S1、微孔膜PP的制备:在二氯甲烷中加入聚甲基丙烯酸甲酯和聚乙二醇-聚丙二醇-聚乙二醇,40KHz超声30S,得微孔膜溶液;所述微孔膜溶液中,聚甲基丙烯酸甲酯的浓度为

6mg/mL,聚乙二醇-聚丙二醇-聚乙二醇的浓度为0.001mg/mL;

取10μL所述微孔膜溶液滴在玻片上,将所述玻片置于25℃、湿度85%的湿度箱中、放置

4小时,在玻片上形成的薄膜为微孔膜PP,得附有微孔膜PP的玻片;

S2、图案化微孔膜捕获胰蛋白酶:将胰蛋白酶用pH7.4的PBS缓冲溶液稀释至0.6mg/mL,得Try溶液;

将步骤S1所述附有微孔膜PP的玻片浸泡于10ml所述Try溶液中30min,再用去离子水冲洗掉未吸附的胰蛋白酶;将玻片上的微孔膜在空气中干燥24h,晾干后玻片上形成的薄膜为附有胰蛋白酶的微孔膜PPT。

9.一种如权利要求1-9任一方法制备的附有胰蛋白酶的微孔膜PPT的应用,其特征在于,所述附有胰蛋白酶的微孔膜PPT具备胰蛋白酶的活性,用于水解蛋白,在蛋白水解时加入所述附有胰蛋白酶的微孔膜PPT。

10.根据权利要求9所述附有胰蛋白酶的微孔膜PPT的应用,其特征在于,所述蛋白为酪蛋白。