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专利号: 2020103499248
申请人: 桂林电子科技大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种基于H-rGO-Pt@Pd NPs纳米复合材料检测GPC3的方法,按以下步骤进行:步骤1:H-rGO-Pt@Pd NPs材料的制备

(1)还原性氧化石墨烯的制备:氧化石墨烯倒入蒸馏水中,使用超声细胞破碎仪超声,溶解均匀,制成GO水溶液;取上述GO水溶液,加入抗坏血酸使其还原GO,得RGO;

(2)血红素/还原性氧化石墨烯的制备:将血红素加入氨水中溶解,得血红素溶液;将血红素溶液与上述RGO溶液混合,以水合肼溶液混合,搅拌得H-rGO混合溶液;

(3)血红素/还原型氧化石墨烯/铂@钯 复合材料的制备:将PDDA和NaCl加入到H-rGO溶液中,搅拌反应,得到PDDA修饰的H-rGO溶液;将Na2PtCl6和Na2PdCl4加入到PDDA修饰的H-rGO溶液中搅拌反应,然后向溶液中加入乙二醇溶液进行混合,用NaOH调节混合溶液的pH值,回流反应;离心清洗即可得到H-rGO-Pt@Pd NPs复合纳米材料;

步骤2:电极的修饰与生物传感界面的构建

(1)将丝网印刷电极置于H2SO4溶液中,进行循环伏安扫描,得到活化后的丝网印刷电极,用水冲洗干净;

(2)将活化后的丝网印刷电极置入氯金酸溶液中,进行恒电位沉积,沉积结束后用水将电极冲洗干净,得到Au NPs/SPCE电极;

(3)将Au NPs/SPCE电极用戊二醛浸泡,用PBS洗涤,吹干,而后滴加H-rGO-Pt@Pd NPs悬浊液孵育一段时间,PBS洗涤,晾干,得到H-rGO-Pt@Pd NPs/Au NPs/SPCE电极;

(4)取羧基化的GPC3适配体滴加到传感器界面,孵育一段时间,用PBS溶液洗涤未固定到界面的GPC3适配体,滴加牛血清蛋白溶液进行封闭,得到GPC3Apt/H-rGO-Pt@Pd NPs/Au NPs/SPCE传感界面,晾干备用;

步骤3:GPC3的标准曲线绘制

(1)将标准GPC3溶液滴加到步骤2得到的GPC3Apt/H-rGO-Pt@Pd NPs/Au NPs/SPCE传感界面,孵育一段时间,用PBS溶液清洗,得到工作电极,晾干备用;

(2)将工作电极放入PBS溶液中,采用电化学工作站的DPV扫描,记录其峰电流;

(3)分别对不同浓度的GPC3进行检测,绘制标准曲线,计算出该方法的最低检测限;

步骤4:实际样品的检测

(1)在步骤2得到的GPC3Apt/H-rGO-Pt@Pd NPs/Au NPs/SPCE传感界面,滴加待测实际样品,孵育一段时间,用PBS溶液清洗,得到工作电极,晾干备用;

(2)将工作电极放入PBS溶液中,采用电化学工作站的DPV扫描,记录其峰电流;

(3)根据步骤3所述标准曲线,得到所述待测实际样品中GPC3的浓度。

2.按照权利要求1所述检测GPC3的方法,其特征在于:步骤1中所述氨水溶液为10μL 

80%,水合肼溶液为8μL,PDDA为2mL 0.2%。

3.按照权利要求1所述检测GPC3的方法,其特征在于:步骤1中所述Na2PtCl6和Na2PdCl4均为2mL 20mmol/L。

4.按照权利要求1所述检测GPC3的方法,其特征在于:步骤1中所述NaCl为5mL 0.2mol/L,NaOH为1mol/L,EG为10mL。

5.按照权利要求1所述检测GPC3的方法,其特征在于:步骤2中所述将电极置于H2SO4中进行循环伏安扫描后,用纯水冲洗干净后,再将电极置于氯金酸溶液中分别进行循环伏安扫描,最后用纯水冲洗晾干备用。

6.按照权利要求1所述检测GPC3的方法,其特征在于:步骤2中所述用于纳米金的沉积溶液为浓度为0.01%的氯铂酸,沉积条件为-0.5 V,沉积时间120 s。

7.按照权利要求1所述检测GPC3的方法,其特征在于:步骤2中所述BSA溶液浓度为

0.5%,PBS的浓度为0.2 mol/L,pH值为7.0,GPC3适配体浓度为5μmol/L。

8.按照权利要求1所述检测GPC3的方法,其特征在于:步骤3和步骤4中所述电极的孵育温度为25°C,孵育时间为1小时,线性扫描范围-0.4 V-1.2 V,扫描速率为0.05 V/s。