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专利号: 2020102717298
申请人: 济南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种检测miRNA-141的生物传感器,其特征在于,包括复合探针S、AgNCs-DNA、miRNA-

141、S4、H1、H2、buffer;

所述的复合探针S是S3与S1、S2杂交成双链形成的;

所用到的碱基序列为:

H1碱基序列如SEQ No.1所示;具体为:5’-GTCTTG-GTTAGATCGCCAAGGTTTCTGTAGCTACGACGATCAGACCTTGGCGAGTCGTAGCTACAGAAACCTTGGCGA-3’;

H2碱基序列如SEQ No.2所示;具体为:5’-ACCTTGGCGAGTCGTAGCTACAGAAACCTTGGCGATCTAACTTCTGTAGCTACGACTCGCCAAGGT-CTGATCCAAGAC-3’AgNCs-DNA碱基序列如SEQ No.3所示;具体为:5’-CCCACCCACCCGCCCAAGTCTTGTCGCCAAGGTCAAGAC-BHQ1-3’S2碱基序列如SEQ No.4所示;具体为:5’-GTCGTAGCTACAGAAACCTTGGCGATCTAAC-3’S3碱基序列如SEQ No.5所示;具体为:5’-gatcgccaaggt-ttctgtagctacgacgggat-ccatctttaccagacagtgtta-3’S1碱基序列如SEQ No.6所示;具体为: 5’-tctggtaaagatggatccc-3’S4碱基序列如SEQ No.7所示;具体为:5’-tctggtaaagatggatcccgtcgtagctacagaaaccttggcgatc-3’miRNA-141碱基序列如SEQ No.8所示;具体为: 5’-uaacacugucugguaaagaugg-3’;

所述AgNCs-DNA的3’连接有-BHQ1。

2.权利要求1所述的生物传感器的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)复合探针S的制备:S3事先与S1、S2杂交成双链,形成复合探针S;

(2)使用发夹AgNCs-DNA链制备纳米银簇AgNCs:

(3)将miRNA-141、S4、S、AgNCs-DNA、H1、H2、buffer、水混合,反应;

(4)加入步骤(2)制备的纳米银簇AgNCs-DNA,荧光检测。

3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述的步骤(1)的过程为:将S3和S1、S2、buffer、水混合均匀,95℃下反应3min,然后慢慢冷却到室温。

4.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述的步骤(2)纳米银簇AgNCs的制备,方法如下:向PB缓冲溶液,加入H2、AgNO3,混匀后4℃放置15-30min,加入现配的NaHBO4,震荡1min,4℃放置4h以上。

5.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述的步骤(3)过程为:取S、S4、H1、H2、buffer、miRNA-141、水混合均匀,在37℃下反应1.2h。

6.采用权利要求2所述的方法制备的生物传感器在非疾病诊断上检测miRNA-122的应用。