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专利号: 2019107535382
申请人: 济南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种定量检测miRNA的荧光生物传感器,其特征在于,包括均相反应液、目标物miR-

122、H1链、H2链、DNA/AgNCs链、血红素、钾离子、半胱氨酸、纳米金;

所述的均相反应液为磷酸缓冲液PBS,组成与浓度如下:20 mM Na2HPO4,20 mM NaH2PO4,

140 mM NaCl,1 mM MgCl2,pH值为7.4;

所述的miR-122碱基序列如SEQ No.1所示;

所述的H1碱基序列如SEQ No.2所示;

所述的H2碱基序列如SEQ No.3所示;

所述的DNA/AgNCs碱基序列如SEQ No.4所示。

2.权利要求1所述的荧光生物传感器的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将目标物miR-122和H1、H2、5×PBS磷酸缓冲液,混匀后37℃恒温反应;

(2)将DNA/AgNCs链与磷酸盐缓冲液混合均匀后,加入AgNO3溶液,混合均匀后静置一段时间后在混合液中加入硼氢化钠,快速震动后黑暗处静置备用;

(3)向步骤(1)和步骤(2)所得溶液加入纳米金、半胱氨酸、血红素,混匀后37℃恒温反应;

(4)将步骤(3)的反应液进行荧光强度检测,荧光仪设置激发波长为560 nm,发射波长为615 nm,检测范围540 nm-660 nm。

3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述的步骤(1)的反应时为2h。

4.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述的步骤(2)加入的AgNO3溶液中银离子与DNA的摩尔比是6:1,且加入AgNO3溶液混合均匀后的反应温度是4℃,时间为15min;

加入硼氢化钠后,快速震动1分钟,反应条件为温度是4℃,时间为6h。

5.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述的步骤(3)的反应时间为2h。

6.权利要求1所述的荧光生物传感器在检测miRNA上的应用。

7.权利要求1所述的荧光生物传感器在定量检测miRNA上的应用。